多胺類組蛋白去乙?；敢种苿┑暮Y選及抗肺癌作用研究.pdf

1、肺癌（lung ca ncer）是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，全球肺癌的發(fā)病率12.7％，死亡率18.1%。中國(guó)肺癌發(fā)病率24.7%，死亡率30.0%，居世界首位，嚴(yán)重威脅我國(guó)人民健康。目前肺癌治療仍然缺乏有效藥物，尤其是肺鱗癌。篩選發(fā)現(xiàn)安全有效的肺癌治療藥物成為亟待解決的公共衛(wèi)生問(wèn)題。
　　本研究采用基于組蛋白去乙?；敢种谱饔玫姆肿訉?duì)接計(jì)算機(jī)虛擬篩選、質(zhì)譜核磁共振分析和體外活性評(píng)價(jià)等技術(shù)，以胱胺和精胺為先導(dǎo)化合物，通過(guò)衍

2、生物的合成，進(jìn)行抗肺癌作用初步評(píng)價(jià)，獲得如下研究結(jié)果：
　　1.建立了組蛋白去乙?；敢种苿┨摂M篩選方法
　　從蛋白質(zhì)晶體數(shù)據(jù)庫(kù)PDB中，選擇HDAC第Ⅰ類中的HDAC2作為抗腫瘤的受體靶標(biāo)。通過(guò)在胱胺和精胺分子兩端引入苯環(huán)、噻吩、呋喃和吡咯等基團(tuán)，共設(shè)計(jì)51個(gè)多胺類結(jié)構(gòu)的衍生物。以已上市的組蛋白去乙?；敢种苿┪鬟_(dá)本胺（CS055）作為陽(yáng)性對(duì)照。用Sybyl-X2.0軟件將受體蛋白與配體庫(kù)化合物進(jìn)行分子對(duì)接試驗(yàn)。綜合分子對(duì)

3、接評(píng)分，發(fā)現(xiàn)6個(gè)化合物對(duì)組蛋白去乙?；敢种谱饔迷u(píng)分超過(guò)陽(yáng)性對(duì)照藥物。
　　2.完成了的6個(gè)化合物候選化合物的合成制備及結(jié)構(gòu)確證
　　采用精胺和胱胺分別與芳香醛、噻吩醛、呋喃醛和吡咯醛進(jìn)行加成反應(yīng)，并還原的合成路線來(lái)制備候選化合物。分析產(chǎn)物核磁共振及質(zhì)譜數(shù)據(jù)，完成了候選6個(gè)化合物結(jié)構(gòu)確證。它們分別為N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-噻吩甲胺)（1b）；N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-氟苯甲胺)（2b）；

4、N,N’-(二硫基-2,1-二乙基)雙(2-呋喃甲胺)（3b）；1,16,-2-(2-吡咯)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（4b）；1,16,-2-(2-呋喃)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（5b）；1,16,-2-(4-羥基苯基)-2,6,11,15-四氮雜十六烷（6b）。
　　3.發(fā)現(xiàn)了4化合物個(gè)對(duì)肺鱗癌細(xì)胞有較好抑制作用
　　采用CCK-8法，以西達(dá)本胺為陽(yáng)性對(duì)照藥物，進(jìn)行候選化合物對(duì)肺鱗癌細(xì)胞NCI-H520

5、和正常人肺支氣管上皮細(xì)胞16HBE的體外抑制試驗(yàn)，篩選NCI-H520細(xì)胞和16BHE細(xì)胞各自合適的細(xì)胞密度和加入CCK-8后的培養(yǎng)時(shí)間，考察候選化合物在7個(gè)給藥濃度0.1、1.0、10、25、50、100、120μMoL/L，作用24 h的抑制效果，并計(jì)算其半數(shù)抑制濃度（IC50）。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，NCI-H520細(xì)胞在96孔板中的接種密度2500個(gè)/孔，培養(yǎng)1～3day，加入CCK-8繼續(xù)培養(yǎng)1h后其OD值在0.85～1.13范圍內(nèi)，16

6、HBE細(xì)胞在96孔板中的接種密度5000個(gè)/孔，培養(yǎng)1～3day，加入CCK-8繼續(xù)培養(yǎng)2h后其OD值在1.05～1.59范圍內(nèi)；選擇9個(gè)化合物及陽(yáng)性藥：1、2、3、4、5、6、10、12、14、19，對(duì)NCI-H520的IC50值分別為222、152、369、5、12、9、2822、157、143、45μMoL/L，對(duì)16HBE的IC50值分別為201、96、80、71、2076、30、2923、143、711、39μMoL/L。發(fā)現(xiàn)