組蛋白去乙?；敢种苿┡c順鉑聯(lián)用對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞作用的體外研究.pdf

1、研究背景：以順鉑為代表的鉑類化合物由于其顯著的抗瘤效應(yīng)，是治療口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)最常用的一類化療藥物。為克服臨床上越來(lái)越多的病人對(duì)順鉑產(chǎn)生的耐藥性及減輕由于用藥劑量所導(dǎo)致的毒副反應(yīng)，以順鉑為核心的聯(lián)合用藥方案是目前口腔腫瘤防治領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)和難點(diǎn)。 研究目的：本課題首次嘗試將新的抗瘤藥物，即組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhib

2、itors，HDACIs)與順鉑進(jìn)行聯(lián)合配伍，探索二者聯(lián)用應(yīng)用于口腔鱗癌治療的可能性，特別是觀察HDACIs與順鉑聯(lián)合應(yīng)用作用于口腔鱗癌細(xì)胞后，是否能增強(qiáng)藥物在體外的抗瘤效應(yīng)，并初步探討二者聯(lián)用作用于口腔鱗癌細(xì)胞的分子機(jī)制。 研究方法：以口腔鱗癌細(xì)胞Tca8113及KB為研究對(duì)象： (1)采用MTS比色實(shí)驗(yàn)研究HDACIs及順鉑單獨(dú)作用于口腔鱗癌細(xì)胞后，對(duì)其生長(zhǎng)增殖的抑制作用，獲得口腔鱗癌細(xì)胞對(duì)單獨(dú)使用兩種藥物的劑量反應(yīng)

3、； (2)采用westem blotting的方法觀察HDACIs作用于口腔鱗癌細(xì)胞后，對(duì)細(xì)胞組蛋白乙?；降挠绊懀?(3)結(jié)合前面1，2所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用低劑量的HDACIs及順鉑進(jìn)行聯(lián)用，運(yùn)用MTS及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞的毒性作用； (4)采用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)及TLJNEL(terminal deoxynucleotidyltransferase dUTP n

4、ick end labeling)檢測(cè)低劑量的HDACIs與順鉑配伍后是否能誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞發(fā)生凋亡，并與單獨(dú)運(yùn)用這兩種藥物的細(xì)胞相比較； (5)采用westem blotting的方法檢測(cè)低劑量的HDACIs與順鉑聯(lián)合應(yīng)用對(duì)以p53為中心的細(xì)胞信號(hào)通路的影響。 研究結(jié)果：兩株口腔鱗癌細(xì)胞都對(duì)HDACIs及順鉑呈現(xiàn)出較好的敏感性并且HDACIs可以迅速導(dǎo)致Tca8113及KB細(xì)胞組蛋白乙?；降奶岣?；與單獨(dú)運(yùn)用低劑量的

5、兩種藥物比較，低劑量的HDACIs及順鉑聯(lián)用可以使兩種藥物的細(xì)胞毒性作用顯著增強(qiáng)(P<0.05)，并明顯誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞發(fā)生凋亡(P<0.05)；兩種藥物進(jìn)行低劑量的聯(lián)用后，可以誘導(dǎo)p53的表達(dá)，活化其下游信號(hào)分子BID，細(xì)胞色素C(Cytochrome C)從線粒體釋放到胞漿中并導(dǎo)致凋亡效應(yīng)分子CaspaSe 3發(fā)生裂解。 結(jié)論：HDACIs可以有效增強(qiáng)口腔鱗癌細(xì)胞對(duì)低劑量順鉑的敏感性，在體外實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)了較好的抗癌效應(yīng)；同時(shí)H