葛根素對小鼠成骨細胞TGF-β-Smad基因蛋白表達影響的研究.pdf

1、目的:
　　探究葛根素干預液對小鼠胎鼠成骨細胞TGF-β1及Smad2/3基因表達的影響，從細胞學層面和分子生物學層面研究葛根素治療骨質疏松癥的機理，為葛根素治療骨質疏松癥提供理論依據(jù)及實驗依據(jù)。
　　方法:
　　取小鼠胎鼠成骨細胞體外培養(yǎng)并進行傳代。分別用1ug/ml，0.1ug/ml，0.01ug/ml濃度的葛根素干預組及空白DMEM對照組作用于成骨細胞，在成骨細胞生長成熟后，運用堿性磷酸酶法（AKP法）及四甲基偶

2、氮唑鹽法(MTT法）檢測各組干預后成骨細胞的活性。檢測出最適宜的干預時間作用細胞活性最高的組別后，提取出成骨細胞內(nèi)mRNA，通過實時熒光定量PCR法及WesternBloting法檢測葛根素干預液對成骨細胞內(nèi)信號轉導通路TGF-β1以及Smad2/3基因表達的影響。
　　結果:
　　細胞AKP實驗和MTT實驗結果顯示出葛根素干預液能夠促進成骨細胞生長，并且該活性的促進與濃度及時間相依賴性。實時定量熒光PCR及WesternB

3、loting結果均顯示不同濃度的葛根素干預液能明顯促進成骨細胞生長轉化因子TGF-β1基因表達，而且在促進Smad2及Smad3的表達時與TGF-β1相平行，與干預液的濃度相依賴。
　　結論:
　　葛根素可以促進成骨細胞的增值及TGF-β1的表達，其下游信號Smad2/3的表達也得到促進。Smad2/3的信號表達與TGF-β1的表達相一致。說明葛根素能夠通過TGF-β1及Smad2/3系統(tǒng)促進成骨細胞的生長，促進骨量增殖，進