α-硫辛酸對(duì)糖尿病大鼠腎臟保護(hù)作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：糖尿病腎病是糖尿病常見(jiàn)的慢性并發(fā)癥之一。隨著糖尿病發(fā)病率的不斷增加，糖尿病腎病的患者數(shù)量也逐年上升。但其確切的發(fā)病機(jī)制一直未完全闡明，從而對(duì)治療造成一定的困難。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激及其誘導(dǎo)的腎臟細(xì)胞凋亡作為糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制的一個(gè)重要方面，它直接參與了糖尿病腎病的發(fā)生與發(fā)展。因此，尋找有效地針對(duì)抗氧化損傷的藥物以減少糖尿病時(shí)腎臟細(xì)胞的凋亡、延緩腎功能的惡化已成為治療糖尿病腎病的一個(gè)新方向。 目的：探討氧化應(yīng)激及其介導(dǎo)的細(xì)

2、胞凋亡在糖尿病腎病發(fā)病中的作用，闡明a-硫辛酸的’腎保護(hù)作用機(jī)制。 方法：腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病模型，并將糖尿病模型大鼠隨機(jī)分為糖尿病非干預(yù)組(DM組)和a-硫辛酸干預(yù)組(LA組)，以正常大鼠作為對(duì)照組(NC組)。12周時(shí)分別測(cè)定血糖(BG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及尿白蛋白排泄率(UAER)。分離雙腎，檢測(cè)腎皮質(zhì)中丙二醛(MDA)的含量及抗氧化酶的活性，包括超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(C

3、AT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)；光鏡、電鏡分別觀(guān)察腎臟的病理形態(tài)學(xué)改變；原位末端標(biāo)記法(nJNEl法)檢測(cè)腎臟細(xì)胞凋亡，免疫組化法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因caspase-3的表達(dá)。 結(jié)果： 1.與NC組相比，DM組大鼠BG、BUN、Scr及UAER均明顯升高(P＜0.01)；LA組BUN、Scr及UAER較DM組下降(P＜0.01或P＜0.05)；DM組和LA組的BG水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.與NC組相比，DM

4、組大鼠腎皮質(zhì)MDA水平明顯升高(P＜0.01)；LA組MDA水平較DM組下降(P＜0.01)。DM組SOD及CAT活性較NC組顯著下降(P＜0.01)，GSH-Px活性顯著上升(P＜0.01)；LA組上述抗氧化酶活性均較DM組升高(P＜0.01或P＜0.05)。 3.DM組腎小球和腎小管凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多(P＜0.01)，腎小管caspase．3表達(dá)明顯增加(P＜0.01)；LA組凋亡細(xì)胞數(shù)較DM組減少(P＜0.01)，cas

5、pase-3的表達(dá)下調(diào)(P＜0.01)。 4.光鏡顯示DM組腎小球體積增大、系膜細(xì)胞增多、系膜區(qū)細(xì)胞外基質(zhì)增生；透射電鏡顯示DM組足細(xì)胞腫脹、足突部分融合成帶狀敷貼于基底膜上。LA組上述形態(tài)學(xué)異常顯著改善。 5.相關(guān)分析顯示：尿白蛋白排泄率分別與腎皮質(zhì)MDA含量、GSH-Px活性、腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率、caspase-3半定量表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.735，P＜0.01；r=0.689，P＜0.01；r=0.866，．P＜0.

6、01； r=0.785，P＜0.01)；與SOD、CAT活性呈負(fù)相關(guān)(r=-0.723，P＜0.01；r=-0.540，P＜0.05)。腎皮質(zhì)MDA分別與腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率、caspase-3半定量表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.841，P＜0.01；r=0.889，P＜0.01)。 結(jié)論： 糖尿病可引起腎臟高水平的氧化應(yīng)激和過(guò)度的細(xì)胞凋亡，caspase-3參與了細(xì)胞凋亡的調(diào)控，上述機(jī)制共同參與了糖尿病。腎病的發(fā)生發(fā)展。a-硫辛酸