祈州漏蘆對糖尿病大鼠腎臟保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病最常見的并發(fā)癥，也是導致終末期腎功衰竭的主要原因之一。DN發(fā)生的機理較為復雜，研究表明：遺傳因素、血流動力學改變、糖基化終產物及多種因子均參與了糖尿病腎病的發(fā)生與發(fā)展。近年來血管內皮生長因子(Vascularendothelial growth factor，VEGF)通過增加血管通透性及引起內皮細胞功能紊亂在DN的發(fā)生及發(fā)展中作用越來越得到重視。細胞外信號調節(jié)激

2、酶(extracellular signalregulated kinase，ERK)是目前發(fā)現的最重要的一個細胞增殖信號調節(jié)蛋白，研究顯示ERK1/2能調控多種炎性介質、細胞因子的表達，在細胞增殖，細胞外基質沉積中起著關鍵作用。祈州漏蘆(rhaponticum unmorum，RU)是多年生菊科植物，其根入藥，近年來的研究發(fā)現RU有提高細胞免疫功能、抗動脈粥樣硬化、抗自由基過氧化、抗缺氧、抗炎及抗衰老等作用。但RU是否對DN有保護作用

3、很少有報道。本研究應用Ru治療糖尿病大鼠，旨在觀察其對糖尿病大鼠腎臟的保護作用，并從RU影響P-ERK、VEGF表達的角度探討DN的發(fā)病機制及RU對DN的保護機制。 方法：實驗動物隨機分為正常對照組(NC組)、糖尿病組(DM組)、祈州漏蘆低劑量治療組(DQ<,1>組)、祈州漏蘆高劑量治療組(DQ<,2>組)、福辛普利鈉治療組(DF組)。觀察治療后血糖、肌酐、尿素及尿白蛋白的變化。應用免疫組織化學法及Western blottin

4、g檢測腎組織VEGF及P-ERK的表達。光鏡及電鏡下觀察腎組織病理學改變。 結果：1．實驗8周末時，DM組、DQ<,1>組、DQ<,2>組、DF組大鼠血糖水平均明顯高于NC組(P<0.01)。治療前后DF組血糖值未見明顯變化(P>0.05)。DQ<,1>組及DQ<,2>組治療前后相比血糖均有明顯降低(P<0.05或P<0.01)。8周末DQ<,1>組、DQ<,2>組、DF組大鼠腎臟肥大指數與DM組比較明顯下降(P分別(0.05、

5、0.01、0.01)，且DQ<,2>與DQ<,1>比較有顯著差異(P(0.01)，；8周末DQ<,1>組、DQ<,2>組、DF組大鼠肌酐、尿素氮與DM組比較明顯下降(P分別(0.05、0.01、0.01)；8周末DM組、DF組、DQ<,1>組.DQ<,2>組尿微量白蛋白均高于NC組(P(0.01)， DQ<,1>組DQ<,2>組、DF組均低于DM組(P分別(0.05、0.01、0.01)，且DQ<,2>與DQ<,1>比較有顯著差異(P(

6、0.01)。 2.免疫組織化學檢測VEGF及P-ERK蛋白在腎臟組織中的定位：正常對照組VEGF于遠端腎小管及近端腎小管胞漿表達，內皮細胞及系膜細胞未見表達；而模型組和治療各組遠端腎小管、近端腎小管胞漿、內皮細胞及系膜細胞均見表達。正常組P-ERK見皮質集合管表達，而腎小球及其它節(jié)段腎小管未見表達。模型組及治療各組遠端腎小管及近端腎小管、內皮細胞及系膜細胞、上皮細胞胞漿均有表達。 3.8周木Western blotting結果：

7、DF組、DQ<,1>組、DQ<,2>組大鼠腎組織VEGF及P-ERK表達均低于DM組(P均為(0.01)，但均高于NC組(P均(0.01)。 DQ<,1>、DQ<,2>組VEGF及P-ERK表達均低于DF組(P分別為(0.05、0.01)。 4.8周末腎組織HE染色可見正常組大鼠腎小球結構完整，未見腎小球增大及異常改變。DM組大鼠腎小球系膜細胞、基質增生，系膜區(qū)顯著增寬，毛細血管壁增厚。各治療組腎組織的病理變化較模型組均有不同程

8、度的減輕，其中以祈州漏蘆高劑量治療組與福辛普利組上述病變較其它組明顯減輕。電鏡下DM組可見腎小球基底膜彌漫或局限性增厚，系膜基質增多，足細胞足突融合、消失。各治療組腎組織的病理變化較模型組均有不同程度的減輕，其中以祈州漏蘆高劑量治療組與福辛普利組上述病變減輕明顯。 結論：1.祈州漏蘆有降低血糖的作用。2.祈州漏蘆有降低腎臟肥大指數的作用、減輕病理損害，改善腎功能、降低尿微量白蛋白的作用，并呈現劑量依賴性。3.腎臟VEGF表達增加