應(yīng)用原位雜交和熒光原位雜交技術(shù)研究結(jié)外彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤與EB病毒感染及基因異常的關(guān)系.pdf

1、目的:利用原位雜交和染色體熒光原位雜交技術(shù)研究廣西地區(qū)結(jié)外彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤與EB病毒染及染色體異常的關(guān)系，探討EB病毒在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤發(fā)病中的作用及其機(jī)制。 方法:①通過(guò)HE和免疫組化切片篩選結(jié)外124例彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤標(biāo)本，并用組織微陣列儀將標(biāo)本制作成組織芯片。用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)CD1O、BCL-6、MIJM1，將彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤病例分成生發(fā)中心型(GCB)與非生發(fā)中心型(non-GCB)兩個(gè)免疫亞型；②

2、通過(guò)原位雜交技術(shù)檢測(cè)兩個(gè)亞型中EB病毒編碼的小核糖核酸(EBERs)的表達(dá)；③應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)檢測(cè)兩組亞型中BCL-6基因斷裂異常和IgH-BCL2基因融合異常情況；④用免疫組化方法檢測(cè)上述病例中Ki-67表達(dá)并比較其在各個(gè)免疫類型中的差異；⑤應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析EB病毒感染在不同免疫類型的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及其與BCL-6基因斷裂異常、IgH-BCL2基因融合異常和Ki-67指數(shù)之間的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果:

3、①根據(jù)CD1O、BCL-6、MUM1蛋白的表達(dá)結(jié)果，124例腫瘤組織中，60例患者確定為GCB型， 64例患者確定為non-GCB型，分別為48.39％和51.61％；②124例彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中EBERs陽(yáng)性率為35.48％，其中GCB組中16例EBERs陽(yáng)性(26.67％)，non-GCB組中28例陽(yáng)性(43.75％)，兩者差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.047，<0.05)，non-GCB組的EB病毒感染率更高；③124例彌漫性大B

4、細(xì)胞淋巴瘤中出現(xiàn)BCL-6基因斷裂異常的有36例(28.03％),IgH-BCL2基因融合異常的有43例(34.68％)，GCB組中BCL．6、IgH-BCL2基因異常陽(yáng)性率分別為20％(12/60)、26.67％(16/60)，non-GCB中BCL-6，IgH-BCL2基因異常陽(yáng)性率分別為37.5％(24/64)、42.19％(27/64)。BCL-6基因分離異常在GCB和non-GCB兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.032，<0.05

5、)，且在non-GCB組中發(fā)生率更高，而IgH-BCL2基因融合異常在GCB和non-GCB兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.07，>0.05)。@Spearman秩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)在GCB組中EB病毒的感染與BCL-6基因分離異常成正相關(guān)(P=0.042，<0.05)，相關(guān)系數(shù)為0.264。⑤Ki-67在GCB組中(+++)24例，(++)22例，(+)4例，(-)10例，non-GCB組中(+++)22例，(++)24例，(+)1例，(-)1

6、7例，通過(guò)秩和檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Ki-67在兩組間表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.375，>0.05)。將Ki-67(+++)定為高表達(dá)組，(++)(+)(-)合并為低表達(dá)組，通過(guò)Spearman秩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)兩組間Ki-67與EB病毒的感染無(wú)相關(guān)性(GCB組P=0.438，non-GCB組P=0.707，>0.05)。 結(jié)論：EB病毒感染在廣西地區(qū)彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中占有比較重要的位置，其中non-GCB組中EB病毒感染顯著高于GCB組，首