海水浸泡脊髓損傷病理變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:未來戰(zhàn)爭已逐漸從內(nèi)陸擴(kuò)展到廣闊的海洋,在海戰(zhàn)中,傷員易墜海,常致不同程度的海水浸泡,海水具有低溫、高滲、低堿性的特點(diǎn),并含有大量特殊的海生致病微生物。海戰(zhàn)時(shí)傷員落水浸泡于海水中,加重了原有的損傷。大宗戰(zhàn)傷資料表明,海戰(zhàn)中休克發(fā)生率為陸戰(zhàn)時(shí)的2倍,死亡率為陸戰(zhàn)時(shí)的5~10倍。我國海岸線廣袤,擁有豐富的海洋資源需要去維護(hù),特別是我國的南海,發(fā)生海戰(zhàn),出現(xiàn)戰(zhàn)傷海水浸泡不可避免。目前國內(nèi)對(duì)海水浸泡對(duì)顱腦、腹腔、胸腔、四肢骨折已開始研究,并

2、已取得初步結(jié)果。但開放性脊髓損傷受到海水浸泡,是否影響創(chuàng)傷后脊髓的繼發(fā)性損傷,這方面的文獻(xiàn)報(bào)道極少。本課題旨在建立海水浸泡脊髓損傷家兔模型的基礎(chǔ)上,觀察了海水浸泡對(duì)脊髓損傷后神經(jīng)功能、病理變化,從不同水平與不同角度探討海水浸泡加重脊髓繼發(fā)性損傷的可能機(jī)制,為臨床上海水浸泡脊髓損傷的處理提供理論依據(jù),指導(dǎo)海戰(zhàn)傷早期的綜合救治。
　　目的:通過建立海水浸泡兔脊髓損傷動(dòng)物模型,觀察脊髓損傷海水浸泡后動(dòng)物神經(jīng)功能改變、脊髓病理形態(tài)改變及神

3、經(jīng)細(xì)胞 Bcl-2、Bax凋亡蛋白表達(dá)情況,并通過TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡,明確脊髓損傷海水浸泡后的特點(diǎn),為海水浸泡脊髓損傷救治提供一定的理論指導(dǎo)。
　　方法:采用改良 Allen`s打擊器造兔脊髓損傷模型,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表,將96只大耳白兔隨機(jī)分為4組:A組:正常組(僅切除椎板不損傷脊髓,n=6);B組:SCI組(切除椎板并造脊髓損傷模型,但不浸泡,n=30);C組:SCINS組(切除椎板并造脊髓損傷模型,生理鹽水浸泡60mi

4、n,n=30);D組:SCISW組(切除椎板并造脊髓損傷模型,海水浸泡60min,n=30)。除A組外,后三組分別根據(jù)處理后1h、6h、12h、24h、48h五個(gè)時(shí)間點(diǎn)分為五組,每時(shí)間點(diǎn)6只,在各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分(Tarlov評(píng)分),并取傷段脊髓,光鏡下觀察傷段脊髓組織病理形態(tài),免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)Bcl-2、Bax的表達(dá)水平,采用TUNEL法檢測(cè)脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:除A組,余組動(dòng)物Tarlov評(píng)分均明顯降低

5、,1h時(shí)間點(diǎn)三組評(píng)分差異不明顯,6h時(shí)間點(diǎn)動(dòng)物Tarlov評(píng)分D組明顯高于B、C兩組,但12h后D組評(píng)分又明顯下降低于B、C組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B、C、D三組傷后均出現(xiàn)創(chuàng)傷性脊髓水腫的病理改變,但水腫高峰出現(xiàn)不一致,B、C組在干預(yù)結(jié)束后6h即出現(xiàn)了明顯創(chuàng)傷性水腫改變,干預(yù)結(jié)束后12h依舊;而D組在干預(yù)結(jié)束后12h出現(xiàn)明顯創(chuàng)傷性水腫改變;B組和 C組兩者水腫同一時(shí)間點(diǎn)差異不明顯。免疫組織化學(xué)檢測(cè), Bcl-2和Bax在B、C、D三組各

6、時(shí)間點(diǎn)均有陽性表達(dá),但D組和B、C兩組在各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)強(qiáng)度有差異(P<0.05),B、C兩組在各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2和Bax表達(dá)強(qiáng)度差異不明顯。D組Bcl-2表達(dá)強(qiáng)度低于B、C兩組,Bax表達(dá)強(qiáng)度在損傷6h后強(qiáng)于B、C兩組,之前則弱于兩組。TUNEL法檢查發(fā)現(xiàn)6h時(shí)間點(diǎn)陽性細(xì)胞數(shù),D組明顯低于B、C組;但12h時(shí)間點(diǎn)陽性細(xì)胞明顯增多,高峰值明顯大于B、C組,后又明顯下降,低于B、C兩組(P<0.01)。
　　結(jié)論:海水浸泡早期有抑制脊髓