兔寰樞椎前脫位不全脊髓損傷早期病理變化的實驗研究.pdf

1、創(chuàng)傷性寰樞椎不穩(wěn)是指寰樞椎遭受創(chuàng)傷后，生理載荷下出現(xiàn)寰樞關節(jié)過度或異?；顒?，并出現(xiàn)一系列臨床癥狀。臨床并不少見，約占頸椎外傷的50％，齒狀突骨折是其常見的原因。寰樞椎不穩(wěn)如加重，可發(fā)生前或后脫位，常合并脊髓及神經根壓迫與刺激，嚴重者可危及患者生命。
　　 尋找一種能夠理想模擬寰樞椎不穩(wěn)脊髓受壓的動物模型并以此進行脊髓神經功能評價，了解脊髓受壓過程中病理特點及神經功能的變化，定性定量地記錄并分析脊髓功能，研究脊髓損傷與神經功能異常

2、的相關性，具有重要意義。因此，我們設計了伴不全脊髓損傷兔寰樞椎前脫位模型，并對動物后肢運動功能及脊髓早期病理變化進行動態(tài)觀察，為臨床上寰樞椎不穩(wěn)致脊髓損傷的防治提供理論依據(jù)。
　　 實驗一伴不全脊髓損傷兔寰樞椎前脫位模型的建立
　　 目的:通過外科手術制備伴不全脊髓損傷兔寰樞椎前脫位模型。
　　 方法:將日本大耳兔16只隨機分成2組:模型制備組（A組）、假手術組（B組），每組8只，以10％水合氯醛腹腔麻醉(劑量3

3、-5ml/kg)，A組麻醉后以頸2為中心，頸前頸后術區(qū)剪毛備皮，先將兔仰臥固定于兔臺上，消毒鋪巾，以頸2為中心于氣管右側做長約4cm切口，顯露寰樞前緣，剪刀剪斷齒狀突基底部，小心松解并分離寰樞外側關節(jié)突關節(jié)囊，即完成模型前路手術;使用特制石膏床輔助將兔俯臥于兔臺上，以頸2為中心作頸后正中切口，顯露頸1側塊，頸2、3棘突，切斷頸1、2后側連接組織，以造成寰樞不穩(wěn)，在體感誘發(fā)電位(SEP)監(jiān)測下，逐漸前屈壓迫寰椎，直至誘發(fā)電位波幅下降達50

4、％水平，在此體位，以2枚1.5mm鈦質克氏針交叉固定頸2棘突與頸1側塊，既完成伴不全脊髓損傷寰樞椎前脫位模型的制備。假手術組僅切開顯露并縫合頸部前后側皮膚，切口長度、位置與實驗組一致，不造成脊髓損傷。B組在麻醉時間監(jiān)測SEP，以排除麻醉過程、手術操作對誘發(fā)電位的影響。各組術前、術后行X片、CT三維重建檢查，并于CT正中矢狀位測量寰樞水平椎管前后徑，并計算椎管受壓比（椎管受壓比=（術前椎管前后徑—術后椎管前后徑）/術前椎管前后徑×100％

5、);過量麻醉法處死動物，以損傷部位為中心切取長約1.5cm的脊髓標本，行光鏡及電鏡觀察脊髓組織學改變。
　　 結果:應用水合氯醛麻醉90分鐘之內及手術前、后階段，假手術組誘發(fā)電位變化無統(tǒng)計學意義。A組影像學檢查可見齒狀突基底部骨折，寰樞椎前脫位，固定用鈦質克氏針位置清晰可見，平均椎管受壓比為37％。術后病理組織學檢查，光鏡顯示:模型組脊髓灰質內偶見少量出血灶，灰白質可見輕度水腫;電鏡下示:神經元胞體基本正常，髓鞘與軸索間隙輕度增

6、大。假手術組脊髓神經結構正常。
　　 結論:外科手術可成功建立實驗性兔伴不全脊髓損傷動物寰樞椎前脫位模型;未發(fā)現(xiàn)麻醉狀態(tài)下及手術操作影響誘發(fā)電位的改變。
　　 實驗二伴不全脊髓損傷兔寰樞椎前脫位早期病理變化動態(tài)觀察
　　 目的:動態(tài)觀察兔伴不全脊髓損傷兔創(chuàng)傷性寰樞椎前脫位模型脊髓早期病理學改變與后肢運動功能變化，為臨床提供理論依據(jù)。
　　 方法:將實驗用兔32只隨機分成4組:脊髓損傷6h（A組）、24h（

7、B組）、72h（C組）組、假手術組（D組），模型制作方法同實驗一，模型制備前后行X片、CT三維重建檢查，并分別于術后6h、24h、72h處死動物取傷段脊髓標本，行HE染色、Tune(l)染色，光鏡、電鏡下觀察組織學改變，動物處死前按改良Tarlov's評分法行后肢運動功能評分，術中及術后予補液，青霉素鈉80萬單位、地塞米松10毫克靜脈滴注，術后三天內予青霉素鈉80萬單位肌注。清醒后注意保溫，每8h擠尿一次。
　　 結果:影像學顯

8、示模型組齒狀突基底部骨折，寰樞椎前脫位，脊髓受壓比平均36％。
　　 1、A組:模型制備后，6h后觀察本組動物均出現(xiàn)不同程度運動功能障礙，改良Tarlov's評分示大部位于3-4分，比例為87.5％;組織學檢查:光鏡下HE染色見灰質較多出血灶，神經元呈微空泡變性，白質水腫，輕度海綿樣變，未見明顯神經元壞死;Tune(l)染色示陽性神經元、陽性膠質細胞顆粒大量表達，細胞核固縮，形態(tài)不規(guī)則，典型呈核內散在分布棕黃色顆粒，并可見凋亡小

9、體，外觀呈梟眼狀。電鏡下見有髓神經纖維髓鞘腫脹、分離嚴重，部分髓鞘斷裂，無髓神經纖維髓鞘消失。軸突變化不明顯。
　　 2、B組:術后24h，改良Tarlov's評分大部位于2-3分，比例為87.5％。組織學檢查:光鏡下HE染色見灰質較大面積的出血灶并波及白質，白質明顯脫髓鞘改變，空泡多見，呈海綿樣;神經元皺縮，呈三角形;Tune(l)染色示陽性神經元、陽性膠質細胞顆粒大量表達，較A組增加，外觀未見明顯改變;電鏡下見髓鞘分層、腫脹

10、、斷裂明顯，可見水腫壓迫軸突，軸突內神經結構成分丟失，形成不規(guī)則空白點及空白區(qū)。
　　 3、C組:改良Tarlov's評分繼續(xù)呈下降趨勢，評分均位于2-3分。組織學檢查:光鏡下HE染色見神經元皺縮，呈三角形，灰質大面積破壞，出血部分吸收，吞噬細胞、膠質細胞增生;Tune(l)染色示:陽性神經元、膠質細胞顆粒仍大量表達，較D組呈下降趨勢;電鏡下見有髓神經纖維髓鞘分層斷裂，較D組變化不明顯。
　　 4、假手術組（D組）:動物