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1、目的:本課題擬使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和聚丙烯酰胺凝膠電泳分析宮頸粘液中細(xì)胞總DNA在STR基因位點(diǎn)的差異性,以達(dá)到鑒定女性胎兒來(lái)源的細(xì)胞或遺傳物質(zhì)的目的。
方法:收集180例孕6-10周在遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科門診行人工流產(chǎn)婦女的宮頸粘液,并同時(shí)取其人流后的絨毛,采用直接法分析染色體核型以確定流產(chǎn)胎兒性別,選取經(jīng)核型分析為孕女性胎兒的宮頸粘液標(biāo)本40例,提取宮頸粘液中細(xì)胞DNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)D21S11、D2
2、1S1411、D21S1412、D21S1414基因進(jìn)行擴(kuò)增,以β-globin基因作為陽(yáng)性內(nèi)對(duì)照,并采用聚丙烯酰胺凝膠電泳及銀染分析擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度。
結(jié)果:在40例確定為孕女性胎兒的DNA標(biāo)本中,均擴(kuò)增出特異性片段,經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠銀染結(jié)果發(fā)現(xiàn),40例標(biāo)本中有27例在D21S11、D21S1411、D21S1412、D21S1414這4個(gè)基因位點(diǎn)呈現(xiàn)完全陽(yáng)性結(jié)果。
結(jié)論:1、孕早期婦女宮頸粘液中可以獲取女性胎
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