茶多酚對(duì)酒精性肝病大鼠核因子κB及環(huán)氧合酶2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本研究采用大鼠酒精灌胃的方法建立酒精性肝病(ALD)早期病變動(dòng)物模型，建模的同時(shí)加以抗氧化劑茶多酚干預(yù)。造模結(jié)束后通過血清肝臟酶學(xué)、脂質(zhì)過氧化指標(biāo)檢測(cè)、光鏡觀察評(píng)價(jià)、電鏡超微結(jié)構(gòu)檢查等方法綜合評(píng)價(jià)各組動(dòng)物病變情況，用半定量RT-PCR及免疫組化方法檢測(cè)NF-κB和COX-2在各組大鼠肝臟的表達(dá)。觀察茶多酚對(duì)大鼠酒精性肝病的干預(yù)作用及其對(duì)核因子κB(NF-κB)和環(huán)氧合酶2(COX-2)表達(dá)的影響。 方法: 32只雌性Wis

2、tar大鼠隨機(jī)分為3組：對(duì)照組6只、模型組13只、茶多酚組13只。以56度白酒加玉米油2g·kg-1·d-1灌胃，白酒起始劑量為8mL·kg-1·d-1，白酒灌胃量每周遞增2mL·kg-1·d-1直至總劑量達(dá)16mL·kg-1·d-1后以該量持續(xù)至第7周末結(jié)束；茶多酚組在模型組的基礎(chǔ)上將茶多酚0.25g·k-1加入白酒中灌胃干預(yù)病變進(jìn)程。實(shí)驗(yàn)至第7周末麻醉后腹主動(dòng)脈取血，檢測(cè)AST、ALT、MDA水平。采血后取肝組織石蠟切片HE染色結(jié)合

3、冰凍切片蘇丹Ⅳ染色觀察脂變程度、炎癥細(xì)胞浸潤、肝細(xì)胞細(xì)胞壞死及纖維化情況。透射電鏡觀察對(duì)照組、模型組及茶多酚組肝細(xì)胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、脂滴產(chǎn)生等超微結(jié)構(gòu)改變。肝組織半定量RT-PCR和免疫組化方法檢測(cè)NF-KB和COX-2在各組大鼠肝臟的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1.模型組與對(duì)照組肝臟血清酶學(xué)及形態(tài)學(xué)檢查顯示兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，ALD模型建立成功。2.茶多酚組與模型組比較：茶多酚組肝小葉內(nèi)脂滴明顯減少，組織學(xué)評(píng)分低于模

4、型組(P＜0.01)。AST、ALT、MDA絕對(duì)值低于模型組且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。RT-PCR及免疫組化均顯示，肝組織中NF-κB及COX-2表達(dá)模型組較對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，茶多酚組較模型組明顯降低(P＜0.01)；NF-κB和COX-2的RT-PCR檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析顯示二者直線相關(guān)。 結(jié)論:氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化參與酒精性肝病的發(fā)生，茶多酚對(duì)大鼠酒精性肝損傷有保護(hù)作用，其機(jī)制可能是通過抑制NF-κB的活化