選擇性環(huán)氧合酶-2抑制劑預防酒精性肝病的實驗研究.pdf

1、目的：本試驗通過酒精灌胃建立ALD大鼠模型，并使用COX-2選擇性抑制劑塞來昔布(Celecoxib)給大鼠灌胃，觀察COX-2在肝組織中的表達狀況及塞來昔布對酒精性肝損傷大鼠肝臟的影響，結合生化和肝臟病理學檢查研究COX-2及其抑制劑在酒精性肝損傷中的作用，探討選擇性COX-2抑制劑在預防ALD發(fā)病過程中所起的作用，為應用塞來昔布防治本病提供理論依據(jù)。 方法：健康雄性Wistar大鼠30只，體重150-200g，正常飲食馴化一

2、周后隨機分為三組：模型組和處理組給予酒精(5-9g·kg-1·d-1)灌胃，模型組大鼠加用Celecoxib(20mg·kg-1·d-1)灌胃，另外設立對照組不加任何處理。除正常組外其余兩組每日上午9時酒精灌胃，模型組下午4時加Celecoxib灌胃，持續(xù)12周。各組均普通顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水和進食，分籠飼養(yǎng)于22±2℃，濕度70％士5％清潔級動物實驗室內。于12周末斷頭處死，留取血清及肝組織進行以下項目測定：硫代巴比妥酸比色法測定丙

3、二醛(MDA)含量；黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)活性；ELISA法檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)；放射免疫法測定6-K-PGFlα和TXB2。肝組織用于快速冰凍切片，行SudanⅣ染色，觀察肝細胞脂變情況；另以10％甲醛固定，常規(guī)包埋、切片，進行蘇木精-伊紅(HE)染色及天狼猩紅染色，觀察肝組織的炎癥、脂肪變性及纖維化程度等。用免疫組織化學染色及RT-PCR技術分別檢測肝臟COX-2蛋白及COX-2mRNA的表達水

4、平。 結論： 1.采用逐漸增加乙醇濃度給大鼠灌胃的方法成功復制了ALD大鼠模型，其病理變化反應了臨床酒精性肝病(例如：脂肪堆積、炎癥、纖維化)。 2.乙醇及其代謝產物破壞肝臟脂質代謝穩(wěn)態(tài)，激活氧化應激，導致過氧化產物MDA增多，抗氧化產物SOD減少，促進細胞因子釋放。氧化應激參與了ALD的發(fā)病。 3.COX-2參與了ALD大鼠的肝損傷，高表達的COX-2促進了前炎性介質PGI2，TXA2等的生成增加。