雌激素對兔視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷的影響.pdf

1、探討雌激素對兔視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷(RIRI)的影響，并通過觀察谷氨酸濃度改變和細(xì)胞凋亡發(fā)生以及Fas/Fas-L在視網(wǎng)膜中表達(dá)的改變探討雌激素對RIRI中視網(wǎng)膜功能保護(hù)的可能的機(jī)制。 材料與方法: 新西蘭白兔50只隨機(jī)分組，對照A組和實(shí)驗(yàn)A組各10只，對照B組和實(shí)驗(yàn)B組各15只，其中對照B組和實(shí)驗(yàn)B組根據(jù)再灌注發(fā)生時間再分為12h、24h、72h三組，每組5只，各組右眼應(yīng)用前房灌注加壓法使前房內(nèi)壓力升高至120mmH

2、g維持60min后再灌注，建立視網(wǎng)膜缺血/再灌注模型，左眼為空白對照眼。所有實(shí)驗(yàn)組在前房灌注前2 h皮下注射17 β-雌二醇(17 β-estrodiol，0.1 mg/kg)，對照組給予等量生理鹽水皮下注射。對照A組和實(shí)驗(yàn)A組在建模前半小時記錄各眼閃光視網(wǎng)膜電圖(ERG)，并在再灌注即時及第4h、8h、24h分別復(fù)測ERG，與缺血前相比觀察a、b波的變化；最后一次ERG檢測后，立即摘除眼球, 采集視網(wǎng)膜組織，研磨及蛋白沉淀后，使用日立

3、L-8800氨基酸自動分析儀檢測游離谷氨酸(Glu)濃度。對照B組和實(shí)驗(yàn)B組分別在再灌注后12h、24h、72h摘取眼球，對視網(wǎng)膜進(jìn)行常規(guī)HE染色切片，觀察細(xì)胞丟失情況及測量視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度，應(yīng)用鏈酶卵白素-生物素復(fù)合體免疫組織化學(xué)法檢測視網(wǎng)膜組織中Fas/Fas-L的表達(dá)變化，同時采用末端脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧三磷酸尿苷缺口末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測視網(wǎng)膜組織中凋亡細(xì)胞。 結(jié)論:雌激素對視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷有治療作用。兔視

4、網(wǎng)膜缺血/再灌注可致視網(wǎng)膜組織中游離Glu濃度升高，是造成視網(wǎng)膜組織損傷的可能機(jī)制之一；而雌激素可以通過阻止Glu濃度升高，從而保護(hù)了視網(wǎng)膜組織。 Fas/Fas-L在兔視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷組織中表達(dá)升高，視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡明顯增多，表明Fas/Fas-L及其介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷機(jī)制之一；雌激素可明顯抑制Fas/Fas-L在視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷中的表達(dá)和視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡，表明雌激素可能通過抑制Fas/Fas-L的