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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:體外循環(huán)(Extracorporeal circulation,ECC)是心內(nèi)直視手術(shù)的一種重要輔助手段,隨著技術(shù)的進(jìn)步,心肌保護(hù)措施不斷提高和完善,且效果良好。然而體外循環(huán)術(shù)后肺部并發(fā)癥仍較高,尤其對(duì)于重癥患者及年幼患兒,體外循環(huán)引起的肺功能障礙已經(jīng)成為術(shù)后并發(fā)癥出現(xiàn)以及死亡的主要原因之一。體外循環(huán)術(shù)后肺功能障礙主要由于肺缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury,I/R)引起,而細(xì)胞凋亡是I/R后細(xì)
2、胞死亡的主要方式之一。隨著對(duì)I/R機(jī)制研究的深入,學(xué)者發(fā)現(xiàn)線粒體膜上的一個(gè)重要結(jié)構(gòu)通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)參與細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié),在I/R過(guò)程中發(fā)揮重要作用。而環(huán)孢素A(cyclosporine A,CsA)作為一種強(qiáng)效的免疫抑制劑,能夠在再灌注早期抑制MPTP的開放,避免細(xì)胞凋亡,起到細(xì)胞保護(hù)作用。
目的:通過(guò)建立兔在體肺I/R模型,并于再灌注
3、前由肺動(dòng)脈注入環(huán)孢素A,通過(guò)電鏡下觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化、免疫組化技術(shù)檢測(cè)肺組織細(xì)胞色素C的含量以及TUNEL法檢測(cè)肺組織細(xì)胞凋亡情況來(lái)評(píng)估CsA對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)效果,為臨床體外循環(huán)肺保護(hù)措施提供理論依據(jù)。
方法:建立兔在體單側(cè)肺缺血再灌注實(shí)驗(yàn)?zāi)P?設(shè)立假手術(shù)組、I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組和(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組,每組10只。模擬臨床心臟外科麻醉方式對(duì)兔進(jìn)行麻醉,麻醉后的兔子仰臥位固定,連接呼
4、吸機(jī)控制呼吸。經(jīng)胸骨正中開胸,游離左肺門留置阻斷帶。按2ml/kg靜脈注射肝素使家兔肝素化,于呼氣末阻斷左肺門,并將呼吸機(jī)潮氣量減少1/3,持續(xù)45min。經(jīng)左肺動(dòng)脈注入藥物,開放血管3h后處死兔子,在冰臺(tái)上快速分離肺組織,取左肺相同部位組織進(jìn)行透射電鏡制樣并在電子顯微鏡下觀察各組肺組織形態(tài)學(xué)變化,采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)肺組織細(xì)胞色素C(cytochrome C,CytC)的含量,TUNEL法檢測(cè)肺組織細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果
5、:肺組織I/R程度由低到高依次為:假手術(shù)組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組、(I/R+低分子右旋糖酐)組和I/R組;肺組織CytC含量由高到底依次為:I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組和假手術(shù)組;細(xì)胞凋亡指數(shù)由高到底依次為:I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組和假手術(shù)組;電鏡下觀察到細(xì)胞內(nèi)線粒體破壞程度由低到高依次為:假手術(shù)組、(I/R+低分子
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