環(huán)孢素A對兔肺缺血-再灌注損傷的保護作用.pdf

1、背景:體外循環(huán)(Extracorporeal circulation,ECC)是心內直視手術的一種重要輔助手段,隨著技術的進步,心肌保護措施不斷提高和完善,且效果良好。然而體外循環(huán)術后肺部并發(fā)癥仍較高,尤其對于重癥患者及年幼患兒,體外循環(huán)引起的肺功能障礙已經成為術后并發(fā)癥出現以及死亡的主要原因之一。體外循環(huán)術后肺功能障礙主要由于肺缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury,I/R)引起,而細胞凋亡是I/R后細

2、胞死亡的主要方式之一。隨著對I/R機制研究的深入,學者發(fā)現線粒體膜上的一個重要結構通透性轉換孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)參與細胞凋亡的調節(jié),在I/R過程中發(fā)揮重要作用。而環(huán)孢素A(cyclosporine A,CsA)作為一種強效的免疫抑制劑,能夠在再灌注早期抑制MPTP的開放,避免細胞凋亡,起到細胞保護作用。
　　目的:通過建立兔在體肺I/R模型,并于再灌注

3、前由肺動脈注入環(huán)孢素A,通過電鏡下觀察肺組織形態(tài)學變化、免疫組化技術檢測肺組織細胞色素C的含量以及TUNEL法檢測肺組織細胞凋亡情況來評估CsA對肺缺血再灌注損傷的保護效果,為臨床體外循環(huán)肺保護措施提供理論依據。
　　方法:建立兔在體單側肺缺血再灌注實驗模型,設立假手術組、I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組和(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組,每組10只。模擬臨床心臟外科麻醉方式對兔進行麻醉,麻醉后的兔子仰臥位固定,連接呼

4、吸機控制呼吸。經胸骨正中開胸,游離左肺門留置阻斷帶。按2ml/kg靜脈注射肝素使家兔肝素化,于呼氣末阻斷左肺門,并將呼吸機潮氣量減少1/3,持續(xù)45min。經左肺動脈注入藥物,開放血管3h后處死兔子,在冰臺上快速分離肺組織,取左肺相同部位組織進行透射電鏡制樣并在電子顯微鏡下觀察各組肺組織形態(tài)學變化,采用免疫組織化學染色法檢測肺組織細胞色素C(cytochrome C,CytC)的含量,TUNEL法檢測肺組織細胞凋亡情況。
　　結果

5、:肺組織I/R程度由低到高依次為:假手術組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組、(I/R+低分子右旋糖酐)組和I/R組;肺組織CytC含量由高到底依次為:I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組和假手術組;細胞凋亡指數由高到底依次為:I/R組、(I/R+低分子右旋糖酐)組、(I/R+低分子右旋糖酐+環(huán)孢素A)組和假手術組;電鏡下觀察到細胞內線粒體破壞程度由低到高依次為:假手術組、(I/R+低分子