伊氏錐蟲?。篖AMP診斷方法和抗血清混合物抗蟲效果的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室以前在伊氏錐蟲病的血清治療方面取得了一定的進(jìn)展，本研究以此為基礎(chǔ)，建立一套完整的血清治療方案來有效地控制伊氏錐蟲病，即建立伊氏錐蟲病的早期診斷技術(shù)和抗血清混合物治療方案。 伊氏錐蟲病的早期診斷技術(shù)：環(huán)介導(dǎo)的DNA等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)是新近發(fā)展起來的一種核酸擴(kuò)增法，它通過一種具有鏈置換特性的BstDNA聚合酶完成靶序列的擴(kuò)增。LAMP同PCR一樣具有

2、高特異性和高敏感性，但LAMP不需變性、退火、延伸等步驟，僅需恒溫加熱就能擴(kuò)增DNA，并且DNA擴(kuò)增與否還可通過白色沉淀的產(chǎn)生來判別。本實(shí)驗(yàn)利用Kuboki等針對(duì)布氏錐蟲PFRA1基因設(shè)計(jì)的引物來建立LAMP反應(yīng)對(duì)伊氏錐蟲病進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)以PCR法作比較，結(jié)果LAMP、PCR均具有100％的特異性，敏感性也均為83％，這些數(shù)據(jù)表明LAMP可取代PCR作為伊氏錐蟲的早期感染或低蟲血癥診斷方法。 抗血清混合物治療：唾傳類錐蟲在感染動(dòng)

3、物后會(huì)刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生顯著而持久的免疫應(yīng)答，并以體液免疫為主。新產(chǎn)生的抗體對(duì)錐蟲有極強(qiáng)的殺傷力，系清除血液中錐蟲的因素。然而錐蟲可以通過體表抗原變異的方式逃避體內(nèi)體液免疫系統(tǒng)的清除。據(jù)預(yù)測(cè)布氏錐蟲的VAT數(shù)超過1000，但在伊氏錐蟲，許多研究表明其優(yōu)勢(shì)VAT數(shù)量是有限的并且比較少。本實(shí)驗(yàn)利用C01、C11、C21、C31、C41和C51六個(gè)伊氏錐蟲YNB株克隆群體分別感染一只新西蘭白兔，之后每隔兩天采集一次血清，共采集10次；將獲得的6