伊氏錐蟲微管結(jié)合蛋白p15基因工程疫苗的研究.pdf

1、伊氏錐蟲病，是由伊氏錐蟲(Trypanosomaevansi)寄生在馬屬動物、牛、駱駝等家畜血液內(nèi)引起的一種血液原蟲病，對畜牧業(yè)造成較大危害。由于錐蟲抗原變異的原因，近年來疫苗研究轉(zhuǎn)向用錐蟲不變成分作為潛在對象，由于膜下微管結(jié)合蛋白p15在錐蟲研究中表明具有很好的免疫原性，且已證明用微管結(jié)合蛋白p15天然蛋白和重組蛋白作為疫苗，在布氏錐蟲(Trypanosomabrucei)上獲得了很高的保護率。 錐蟲膜下微管結(jié)合蛋白p15在種

2、間具有保守性，本研究根據(jù)報道的布氏錐蟲微管結(jié)合蛋白p15(Tb-MAPp15)基因及其3'非翻譯區(qū)保守序列設(shè)計引物，采用PCR法從伊氏錐蟲云南水牛株基因組DNA中首次擴增得到伊氏錐蟲微管結(jié)合蛋白p15(Te-MAPp15)基因。成功構(gòu)建重組原核表達載體和真核表達載體，并制備亞單位疫苗和核酸疫苗。 分別用制備的重組亞單位疫苗，核酸疫苗以及核酸疫苗-重組亞單位疫苗聯(lián)合使用免疫小鼠。免疫后攻蟲，進行抗體水平、NO濃度及疫苗保護效果檢測