羅氏海盤車（Asterias rollestoni）水溶性海星皂苷的分離純化及其部分生物學(xué)活性研究.pdf

1、海星皂苷是具有廣泛生理和藥理活性的天然海洋活性物質(zhì)。目前，對海星皂苷的提取主要采用稀醇萃取法，這種方法存在著有機溶劑使用量大、成本高、易污染環(huán)境、不利于工業(yè)化推廣等一系列缺點，而且更為重要的是所得海星皂苷水溶性較差，在應(yīng)用方面受到很大限制。 本文旨在利用水抽提法、大孔樹脂吸附、硅膠柱層析以及Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱等方法對水溶性海星皂苷進行提取和分離純化，并從中篩選出具有較強抗真菌和抗腫瘤活性的單體組分。

2、 水溶性海星皂苷性質(zhì)鑒定結(jié)果顯示，利用水抽提、大孔樹脂吸附所得水溶性海星皂苷粗品為甾體皂苷?？拐婢钚缘蔫b定結(jié)果表明，水溶性海星皂苷粗品對黑曲霉(Aspergillus niger)、白色念珠菌(Candida albicans)、啤酒酵母菌(Saccharomyes cerevisise)、裂殖酵母菌(Schizosaccharomyce sprobe)、黃瓜枯萎病原菌(Fusarium oxysporumf sp.cucumerin

3、um)、葡萄炭疽病原菌(Colletotrichumgloeosporioides)6種真菌均具有顯著的抗真菌活性，其最低抑菌濃度分別為0.625、0.625、0.313、0.156、1.25和0.625 mg/mL。抗腫瘤活性的鑒定結(jié)果顯示，水溶性海星皂苷粗品對體外培養(yǎng)的HeLa宮頸癌細胞、SGC-7901胃癌細胞、A-549肺癌細胞和Bel-7402肝癌細胞均具有顯著的抗腫瘤活性，其IC50值分別為14.66、15.37、13.44

4、和12.74μg/mL對水溶性海星皂苷粗品進行硅膠柱層析，分離純化得到4種水溶性海星皂苷純化組分pSF-1、pSF-2、pSF-3和pSF-4?？拐婢钚缘暮Y選結(jié)果表明，pSF-3和pSF-4具有顯著的抗真菌活性?？鼓[瘤活性篩選結(jié)果表明pSF-3和pSF-4具有顯著的抗腫瘤活性，其中pSF-3對HeLa宮頸癌細胞、SGC-7901胃癌細胞、A-549肺癌細胞和Bel-7402肝癌細胞的IC50值分別為7.05、5.28、5.32、6.1

5、6μg/mL；pSF-4對HeLa宮頸癌細胞、SGC-7901胃癌細胞、A-549肺癌細胞和Bel-7402肝癌細胞的IC50值分別為7.24、5.94、5.24、6.21μg/mL。 利用Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱對硅膠柱層析組分進行純化，并利用高效液相色譜(HPLC)對其純度進行了測定，結(jié)果表明SF-3單體組分純度很高，達96％以上。 對SF-3單體組分進行體內(nèi)外抗腫瘤活性研究結(jié)果表明，2.5、5和10

6、μg/mL的SF-3單體組分對體外培養(yǎng)的HeLa和肝癌細胞具有顯著的抑制作用；灌胃劑量為2、5和10mg/kg體重的SF-3單體組分能夠顯著抑制小鼠S180移植瘤的生長，其抑制率分別為23.34％、36.33％和46.53％，在較高劑量下能夠顯著提高S180荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。 綜上所述，本文利用水抽提、大孔樹脂吸附、硅膠柱層析以及Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱層析等方法得到了具有顯著生物學(xué)活性的水溶性海星皂