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文檔簡介
1、蘆筍(Asparagus officinalis Linne)學名石刁柏,又名龍須菜,屬百合科(Liliaceae)植物,含有豐富的類黃酮化合物蘆丁(Rutin)。類黃酮是藥用植物中的主要活性物質之一,具有抗炎癥、免疫調節(jié)活性、抗腫瘤、調節(jié)血脂、抗氧化、自由基清除、抗病毒等多種生物活性。近年來,關于蘆筍的開發(fā)和利用受到人們的廣泛關注。 本研究采用超聲波法和索式抽提法提取蘆筍總黃酮,按照60%、70%、80%、90%四個乙醇溶液梯
2、度提取。單波長法測定,檢測波長510nm。實驗結果表明,超聲波法提取總黃酮的穩(wěn)定性的相對標準偏差(RSD)在3.75%~6.15%之間,而索氏提取法提取總黃酮的穩(wěn)定性的RSD在1.08%~3.44%之間;超聲波法提取總黃酮的重復性的RSD在1.34%~3.26%之間,索氏提取法提取總黃酮的重復性的RSD在2.19%~4.95%之間;在回收率方面,兩種方法提取的黃酮回收率均在97.90%~106.6%范圍內。從穩(wěn)定性、重復性、回收率來看,
3、這兩種提取方法結果準確可靠,均可用于后續(xù)試驗。而從黃酮提取的得率來看,80%乙醇濃度索氏提取法所得黃酮的得率最高,達到了5.305mg/g的得率,即每克蘆筍干粉可得黃酮類物質5.305mg黃酮。因此,確定本實驗提取黃酮采用索氏提取法,提取溶劑為80%乙醇溶液,提取時間為回流提取6h。 通過研究黃酮對LPS刺激體外培養(yǎng)的巨噬細胞RAW264.7產生NO的量,進一步證實黃酮清除自由基、抗氧化的效果。LPS與黃酮同時加入共培養(yǎng)72h,
4、只有黃酮400μg/ml、800μg/ml兩組效果明顯;LPS刺激48h后再加入黃酮,過24h后取上清測NO,6個黃酮刺激組200μg/ml黃酮時效果最明顯,而且均強于LPS與黃酮同時加入的組。推斷在對LPS刺激巨噬細胞產生NO的影響效果上,蘆筍黃酮提取物清除培養(yǎng)液中NO自由基的效果要明顯強于其對iNOS免受激活的保護上。 以D-半乳糖衰老小鼠為研究對象,觀察蘆筍黃酮對D-半乳糖衰老小鼠學習記憶功能的影響,對其腦組織中脂褐素、超
5、氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)、乙酰膽堿酯酶(TchE)的影響。以4周齡雄性昆明種小鼠,給以400mg/kg腹腔注射,每天一次,持續(xù)8周。同時給于低劑量50mg/kg、中劑量100mg/kg、高劑量500m/kg黃酮溶液飲用,與建立模型一樣,共飲用8周。實驗指標檢測結果顯示,8周后模型組小鼠毛色灰暗稀疏,行動遲緩,在新環(huán)境中理毛次數(shù)和站立次數(shù)要明顯少于治療組。記憶能力檢測顯示,Y水迷宮避暗實驗結果顯示,中
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