低氘水對(duì)D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化作用的研究.pdf

1、一、研究背景
　　 水是地球上最常見的物質(zhì)之一，是包括人類在內(nèi)所有生命生存的重要資源，也是生物體最重要的組成部分。正常人體中水占體重的60％，是機(jī)體中含量最大的組成成分。它作為溶劑，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和代謝，把溶于其中的營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)送到組織細(xì)胞，發(fā)揮其有效的營養(yǎng)生理作用；其本身也參加體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)，促進(jìn)各種生理、生化活動(dòng)。可以說沒有水，人體的一切代謝反應(yīng)都會(huì)停止。
　　 眾所周知，水是由兩個(gè)氫原子一個(gè)氧原子組成的化

2、合物。氫原子有三個(gè)同位素，氫(氕H)、重氫(氘D)、超重氫(氚T)。氕核內(nèi)僅含一個(gè)質(zhì)子沒有中子，氘核內(nèi)包含一個(gè)質(zhì)子一個(gè)中子，氚核則由一個(gè)質(zhì)子和二個(gè)中子組成，其質(zhì)量分別是1、2、3。因此，氘核質(zhì)量大約相當(dāng)于氕核的2倍。自然界中D/H比約為1∶6600，重氫(氘)的含量約為150ppm。世界范圍內(nèi)的一項(xiàng)降水中氫同位素調(diào)查顯示氘含量在120～160ppm不等。氘為氫的穩(wěn)定同位素，同時(shí)也是種微量元素，在水中和有機(jī)體中的含量要比諸如銅、鎘、錳、鋅

3、、鉬等元素高。氘氧重水與氕氧輕水對(duì)生命體有著截然相反的影響作用。早在1959年～1960年前蘇聯(lián)學(xué)者羅基莫夫和托羅采夫，用低氘水喂養(yǎng)動(dòng)物，進(jìn)行的動(dòng)物機(jī)能活性試驗(yàn)已經(jīng)證明：低氘水能促進(jìn)激發(fā)動(dòng)物的機(jī)能活性。動(dòng)物機(jī)能活性的提高，促進(jìn)了動(dòng)物的新陳代謝。有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)低氘水能減緩癌細(xì)胞增殖，對(duì)腫瘤移植小鼠的腫瘤生長起到明顯的抑制作用，其機(jī)制可能與誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞S期阻滯和細(xì)胞凋亡有關(guān)。日本研究顯示富含氫的水對(duì)糖類、脂代謝均起到有利的作用，可預(yù)防或延遲Ⅱ型

4、糖尿病和胰島素抵抗的病情進(jìn)展。但有關(guān)低氘水的抗氧化作用仍未見報(bào)道。
　　 隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展，人民的生活水平日益提高，人們對(duì)長壽的不懈追求使抗氧化、防衰老研究成為了科學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)課題。衰老是由多因素、多器官參與的一個(gè)自然生物學(xué)過程，不同領(lǐng)域的研究者對(duì)衰老的理解仍然存在較大的分歧，且各種學(xué)說均有其局限和困惑。1956年由Harman首次提出的自由基學(xué)說，將諸多學(xué)說聯(lián)系起來，受到了廣泛的認(rèn)可和深入的發(fā)展。自由基損傷學(xué)說認(rèn)為伴隨年

5、齡增長，機(jī)體防御酶體系清除自由基能力下降，體內(nèi)的自由基代謝紊亂，自由基對(duì)機(jī)體組織細(xì)胞的損傷積累增加，最終導(dǎo)致組織器官機(jī)能形態(tài)老化，從而促成機(jī)體的衰老。
　　 本課題基于現(xiàn)今關(guān)于抗氧化作用的最新研究進(jìn)展，用D-半乳糖制備小鼠衰老模型，測(cè)定小鼠多個(gè)組織器官抗氧化相關(guān)指標(biāo)，研究低氘水對(duì)衰老模型小鼠的抗氧化作用，從而為進(jìn)一步探討低氘水對(duì)人體抗衰老作用機(jī)制以及低氘水保健飲品的開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 二、研究目的
　　 低

6、氘水對(duì)D-半乳糖衰老模型小鼠的多個(gè)組織器官的抗氧化作用。
　　 三、研究方法
　　 將24只雄性ICR小鼠按體重隨機(jī)分為3組，分別為正常對(duì)照組、衰老模型組、低氘水實(shí)驗(yàn)組，每組8只。正常對(duì)照組每日頸背部皮下注射生理鹽水，其余各組每日皮下注射D-半乳糖100 mg/kg，連續(xù)7周，建立衰老模型；正常對(duì)照組、衰老模型組飲用普通水，實(shí)驗(yàn)組飲用低氘水。7周后獲取小鼠心、腦、肝、血清等組織測(cè)定相關(guān)抗氧化酶及氧化產(chǎn)物，具體內(nèi)容如下：<

7、br>　　 血清：超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)；
　　 腦組織：總抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)、脂褐質(zhì)(LPO)、Na+-K+-ATPase、MDA;
　　 心肌組織：SOD、單胺氧化酶(MAO)、乳酸脫氫酶(LDH)、MDA；
　　 肝組織：SOD、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、MAO、MDA。
　　 四、研究結(jié)果
　　 (一)血清
　　 正常組、衰老

8、模型組、低氘水實(shí)驗(yàn)組三組血清SOD、MDA指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LSD法兩兩比較得，衰老模型組小鼠較正常對(duì)照組SOD活性降低(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01)，MDA含量增多(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)。低氘水實(shí)驗(yàn)組與衰老組相比血清SOD增高13.05 U/ml(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01)，MDA減少2.01nmol/ml(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01)。
　　 (二)心肌
　　 正常組、衰老模型組、低氘水實(shí)驗(yàn)組三組心肌S

9、OD、MDA、MAO指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LSD法兩兩比較得，衰老模型組小鼠心肌組織勻漿SOD活力低于正常對(duì)照組(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01)，心肌中MDA含量較正常對(duì)照組增加(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)。與衰老模型組小鼠相比，低氘水實(shí)驗(yàn)組心肌勻漿SOD活力升高(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)，MAO含量降低(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組MDA含量降低，實(shí)驗(yàn)組LDH活力與衰老模型組相比有所升高，未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 (

10、三)腦組織
　　 正常組、衰老模型組、低氘水實(shí)驗(yàn)組三組腦組織T-AOC、MDA、Na+-K+-ATP酶、NO、MAO、LPO指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LSD法兩兩比較得，衰老組小鼠腦組織勻漿T-AOC活力低于正常對(duì)照組(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)，LPO、MDA含量高于正常對(duì)照組(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)。低氘水實(shí)驗(yàn)組較衰老模型組小鼠腦組織勻漿Na+-K+-ATP酶活力提高(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)，NO活力降低(有統(tǒng)計(jì)學(xué)

11、差異，P＜0.05)，LPO、MDA含量減少(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)，T-AOC有所升高，但未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 (四)肝組織
　　 正常組、衰老模型組、低氘水實(shí)驗(yàn)組三組肝臟組織SOD、GSH-Px、MDA、MAO指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LSD法兩兩比較得，衰老組肝組織勻漿SOD、GSH-Px活力降低(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)、MDA含量增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05)。與衰老模型組小鼠相比，實(shí)驗(yàn)