雞球蟲病活疫苗的研制.pdf

1、雞球蟲病是一種呈全球性分布的原蟲病,其發(fā)病率可高達50﹪～70﹪,死亡率為20﹪～30﹪,嚴重者高達80﹪.每年,全世界因球蟲病造成的經濟損失超過30億美元.雖然使用抗球蟲藥這種傳統(tǒng)方法在球蟲病防治中發(fā)揮了積極的作用,但是球蟲耐藥株的不斷出現(xiàn)、公眾對藥物殘留的恐懼以及新藥研制的缺乏,使得活疫苗接種在不久的將來會成為控制球蟲病的主要措施.因此,我們開展了本項研究,并取得如下結果: (1)改進了單卵囊分離技術,成功分離到柔嫩、毒害、

2、巨型、堆型、和緩、布氏和早熟艾美耳球蟲蘭州株;克隆了堆型艾美耳球蟲全長1.7Kb的18S rRNA基因,分析了其遺傳、進化特點,為從分子水平上研究艾美耳球蟲種系發(fā)生、遺傳進化、蟲種分類與鑒定等奠定了基礎. (2)測定了所分離蟲株的毒力(即致病性).實驗證實:每只雞感染6×10<'4>個孢子化卵囊時,引起較嚴重的腸道病變,生長嚴重受阻;每只雞感染9×10<'5>～1.2×10<'6>個孢子化卵囊時,約半數(shù)感染雞致死:而1.8×10

3、<'6>個孢子化卵囊的感染劑量可致全部感染雞死亡.這為進行疫苗配制及其免疫效果評價時選擇適宜的攻蟲劑量提供了參考依據. (3)研制出四價雞球蟲病活疫苗(LCV)、五價雞球蟲病活疫苗(LCV-1)和六價雞球蟲病活疫苗(LCV-2),在實驗條件下,給5-10日齡雛雞經口接種疫苗,兩周后用與疫苗同源的混合孢子化卵囊大劑量攻蟲,以相對增重率、死亡率、腸道剖檢病變計分,平均OPG值和抗球蟲指數(shù)(ACI)為評價指標,觀察了這三種疫苗的安全性

4、和免疫效果.篩選出了最佳免疫劑量,結果也證實了這三種疫苗安全性高,免疫保護效果顯著,與國內外同類疫苗相當. (4)對比研究了LCV-2號對籠養(yǎng)和平養(yǎng)雞的免疫效果,證實LCV-2對籠養(yǎng)雞和平養(yǎng)雞都有較強的免疫效果,而且LCV-2安全性高,即使漏免也不會造成雞只發(fā)病. (5)評價了兩種β-葡聚糖對LCV的免疫增強效果.結果表明,在攻蟲后7天和14天,所有免疫組雞的體重均極顯著(P<0.01)高于攻蟲對照組、香菇糖組和酵母糖組