大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗的研制與免疫效應(yīng)研究.pdf

1、本研究開展了大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗的制備及佐劑的篩選;接種疫苗后進(jìn)行了大鯢血清中溶菌酶活力、ACH50活力、抗體水平，血液中主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅰ基因、MHCⅡA基因的表達(dá)和干擾素α誘導(dǎo)蛋白(IFI)6基因的表達(dá)變化及免疫保護(hù)率的測(cè)定。通過檢測(cè)疫苗接種大鯢后免疫相關(guān)指標(biāo)和保護(hù)效果的研究，旨在為有效防控大鯢蛙病毒病提供理論依據(jù)。
　　通過β-丙內(nèi)酯(BPL)滅活CGSRV，制備滅活疫苗、黃芪多糖(astragal

2、uspolysaccharide，APS)佐劑疫苗和ISA763A佐劑疫苗3種疫苗。3種疫苗經(jīng)過無菌及安全檢查合格后，腹腔注射試驗(yàn)大鯢，每尾0.3mL。分別測(cè)定疫苗接種后第10d、20d、30d和40d大鯢血清中溶菌酶活力、ACH50活力及抗體水平和測(cè)定血液中MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI6基因的表達(dá)等免疫指標(biāo);免疫40d后進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，每組攻毒15尾，連續(xù)觀察40d統(tǒng)計(jì)死亡率和測(cè)定相對(duì)免疫保護(hù)率;每組剩余的5尾不做處理，用于抗體

3、水平的檢測(cè)。結(jié)果表明:滅活疫苗、佐劑疫苗均能不同程度提高機(jī)體免疫水平，大鯢的抗體水平，ACH50活力，MHCⅠ基因、MHCⅡA基因和IFI6基因的表達(dá)都有不同程度提高，而三種疫苗對(duì)溶菌酶活力影響不同，僅APS佐劑疫苗能提高溶菌酶活力。ISA763A+Ag疫苗組、APS+Ag疫苗組和Ag疫苗組的相對(duì)免疫保護(hù)率（RPS）分別為85.71％、71.43％和64.29％，ISA763A佐劑和APS佐劑分別提高了21.41％和7.14％的免疫保護(hù)

4、率，由于ISA763A佐劑的效果更好，故推薦使用ISA763A作為CGSRV疫苗的佐劑。
　　以上試驗(yàn)結(jié)果證明:大鯢蛙病毒(CGSRV)滅活疫苗不僅能夠提高大鯢的特異性免疫水平，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體，誘導(dǎo)MHCⅠ基因和MHCⅡA基因的表達(dá);而且能提高大鯢非特異性免疫水平，提高機(jī)體ACH50活力以及誘導(dǎo)大鯢的抗病毒細(xì)胞因子IFI6基因的表達(dá)。黃芪多糖和ISA763A兩種佐劑都能提高CGSRV滅活疫苗的免疫效應(yīng)，其中ISA763A佐