豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）活疫苗研制.pdf

1、本研究使用華中農(nóng)業(yè)大學(xué)病毒室分離、鑒定的豬繁殖與呼吸綜合征病毒PRRSVHA株進(jìn)行PRRSV活疫苗的研制。Marc-145是近年來(lái)應(yīng)用較多的細(xì)胞，對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征病毒敏感性高，病毒能達(dá)到較高的滴度，均在10-4.5/0.1ml以上。并對(duì)其細(xì)胞系進(jìn)行了顯微鏡檢查、細(xì)菌和霉菌檢驗(yàn)、支原體檢驗(yàn)、病毒檢驗(yàn)、細(xì)胞鑒別、胞核學(xué)檢查、致瘤和致癌性檢驗(yàn)檢驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果為：Marc-145細(xì)胞為致密的多邊形狀；不含厭氧菌和兼性需氧菌、無(wú)霉菌污染、不含有

2、支原體、不含外源病毒及病毒強(qiáng)毒；尚無(wú)致瘤和致癌性。 對(duì)疫苗成品的安全性檢驗(yàn)，中試的6批疫苗每批都采用了4頭10-15日齡初生乳豬，4頭斷奶仔豬和2頭妊娠60-70天的母豬分別進(jìn)行單劑量、單劑量重復(fù)、加倍劑量注射，觀察結(jié)果均未出現(xiàn)任何不良反應(yīng)，甚至10倍大劑量免疫也無(wú)異常，健活；懷孕母豬未出現(xiàn)不良反應(yīng)，無(wú)流產(chǎn)，死胎等情況出現(xiàn)，均正常分娩，胎兒發(fā)育正常。疫苗免疫后，在排泄物和分泌物中未能分離到病毒，不散毒，不存在污染環(huán)境和任何潛在危

3、險(xiǎn)。因此證實(shí)該疫苗是安全的。 本疫苗的免疫效力試驗(yàn)，4批中試產(chǎn)品分別將疫苗按瓶簽注明肌肉注射PRRSV抗體陰性仔豬4頭，1頭份/頭，同條件相同的對(duì)照組，免疫后28天進(jìn)行PRRSV強(qiáng)毒攻擊(4ml/頭)。觀察發(fā)病(出現(xiàn)呼吸困難、體溫升高等癥狀，判為發(fā)病)情況，免疫豬均保護(hù)4/4。通過(guò)乳豬、仔豬和妊娠母豬分別進(jìn)行免疫效力試驗(yàn)，免疫后2周可檢測(cè)到PRRSV病毒中和抗體，到第4周抗體水平最高達(dá)到1：16，至第8周未見(jiàn)明顯地下降。