左旋卡尼汀預(yù)處理對離體兔心缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:采用Langendorff離體心臟灌注模型，研究： (1)不同濃度左旋卡尼汀(L-Car)預(yù)處理對離體兔心缺血再灌注心臟功能的影響； (2)左旋卡尼汀(L-Car)預(yù)處理對離體兔心缺血再灌注損傷的影響。 方法: 第一部分24只家兔隨機(jī)分為4組，每組6只，分別為對照組(Con組)、L-Car預(yù)處理1組(L-Car2.5組)、L-Car預(yù)處理2組(L-Car5.0組)和L-Car預(yù)處理3組(L-Car1

2、0.0組)。采用Langendorff法建立離體全心臟灌注模型，實(shí)驗(yàn)各組離體兔心用K-H液(K-H液先經(jīng)95％O2+5％CO2混合氣體飽和)平衡灌注10min，接著用不同濃度L-Car灌注液灌注15min，然后予4℃標(biāo)準(zhǔn)St.Thomas停搏液(K+16mmol/L)灌注至心臟停跳，鉗閉灌注管停止灌注45min，恢復(fù)再灌注20min。Con組離體兔心用K-H液(K-H液先經(jīng)95％O2+5％CO2混合氣體飽和)持續(xù)灌注25min，然后的操

3、作與實(shí)驗(yàn)組相同。分別在平衡10min、灌注停跳液前即刻、再灌注后5min、10min、20min等時間點(diǎn)，記錄實(shí)驗(yàn)各組的左室發(fā)展壓(LVDP)、左室內(nèi)壓上升最大速率(+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓下降最大速率(-dp/dtmax)、心率(HR)、冠脈流量(CF)。以灌注10min的LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、HR作為基礎(chǔ)值，計(jì)算以上指標(biāo)再灌注5min、10min、20min時占基礎(chǔ)值的百分比即為LVDP恢復(fù)率、+d

4、p/dtmax恢復(fù)率、-dp/dtmax恢復(fù)率、HR恢復(fù)率。測定各組心臟誘導(dǎo)停搏時間(TA)和復(fù)跳時間(TR)。 第二部分將12只家兔隨機(jī)分為2組：對照組(Con組)、L-Car預(yù)處理組(L-Car5.0組)。Con組和L-Car預(yù)處理組實(shí)驗(yàn)操作同第一部分。測定平衡10min、灌注停跳液前即刻、再灌注后1min、5min、10min、15min、20min等時間點(diǎn)冠脈流出液中的肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)釋放量；測定再

5、灌注心肌組織中丙二醛(MDA)、游離脂肪酸(FFA)含量，超氧化物歧化酶(SOD)的活性；計(jì)算心肌存活面積百分比，并采用透射電鏡觀察心肌超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果:第一部分各實(shí)驗(yàn)組心臟停跳時間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 L-Car預(yù)處理各組的心臟復(fù)跳時間均短于對照組，縮短幅度排序?yàn)長-Car10.0組>L-Car5.0組>L-Car2.5組，呈隨濃度增加而增大。其中L-Car10.0組、L-Car5.0組與L-Car2.5組和對照組的差異

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而L-Car2.5組雖短于對照組，但統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異。 灌注停跳液前兩時間點(diǎn)各組冠脈流量(CF)、心率(HR)、左室發(fā)展壓(LVDP)、左室內(nèi)壓上升最大速率(+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓下降最大速率(-dp/dtmax)無顯著性差異。 再灌注后各組CF均有增加。其中L-Car5.0組和L-Car10.0組，再灌注后各時間點(diǎn)的CF，比平衡lOmin時的CF顯著增加；而L-Car2.5組和對照組再灌注后各時

7、間點(diǎn)的CF與平衡10min時相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。再灌注5min時，L-Car10.0組的CF與L-Car2.5組的相比顯著增加；再灌注10min時，L-Car5.0組和L-Car10.0組的冠脈流量，比對照組和L-Car2.5組顯著增加。 再灌注后，各組的HR、LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax均有下降，但L-Car預(yù)處理組下降幅度減小，其中L-Car5.0組和L-Car10.0組的HR、LVDP、+dp/dtmax

8、、一dp/dtmax等指標(biāo)，再灌注后與對照組相比顯著增加，而這兩組間相比無顯著差異。HR、LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtrmax的恢復(fù)率L-Car5.0組、L-Car10.0組顯著優(yōu)于對照組，其它比較無顯著性差異。 第二部分實(shí)驗(yàn)兩組灌注停跳液前的LDH、CK各組間無顯著性差異，再灌注后LDH、CK均有增加，再灌注后L-Car5.0預(yù)處理組各時間點(diǎn)的CK、LDH釋放量均低于對照組。L-Car5.0預(yù)處理組SOD活性顯著

9、高于對照組，MDA含量低于對照組，F(xiàn)FA含量顯著低于對照組。L-Car5.0預(yù)處理組心肌存活面積百分比(76.67％)高于對照組(59.83％)，透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)損傷，尤其是線粒體的損傷，小于對照組。 結(jié)論: 1、L-Car預(yù)處理能縮短復(fù)跳時間、改善冠脈流量，能改善兔心離體缺血再灌注心臟功能，藥物濃度為5.0mmol/L和10.0mmol/L時具有較好保護(hù)作用。 2、L-Car預(yù)處理可以顯著減輕心肌細(xì)胞的損傷