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1、目的:通過觀察缺血預(yù)處理(IPC)延遲保護(hù)作用對兔脊髓缺血再灌注損傷動物神經(jīng)功能、組織病理學(xué)及熱休克蛋白70(HSP70)的變化,研究缺血預(yù)處理延遲保護(hù)作用對神經(jīng)細(xì)胞凋亡及HSP70的影響?! 》椒ǎ翰捎媚I下腹主動脈阻斷法,建立兔脊髓缺血再灌注損傷模型。65只健康新西蘭大白兔隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(n=5)、缺血組(n=30)及缺血預(yù)處理組(n=30)。假手術(shù)組只進(jìn)行手術(shù)操作,不阻斷腹主動脈。缺血組阻斷腹主動脈35分鐘后再灌注,缺血預(yù)
2、處理組先阻斷腹主動脈5分鐘,開放10分鐘,重復(fù)三次,48小時后再阻斷35分鐘后開放再灌注。術(shù)后進(jìn)行神經(jīng)功能評分,缺血組與缺血預(yù)處理組分別于再灌注8小時、12小時、24小時、48小時、7天神經(jīng)功能評分后處死動物,取L2--5段脊髓行病理學(xué)檢查,用HE染色觀察脊髓標(biāo)本的一般病理學(xué)改變,TUNEL法染色觀察脊髓標(biāo)本的細(xì)胞凋亡情況,SP法測定脊髓標(biāo)本HSP70的表達(dá)情況?! 〗Y(jié)果:缺血組:再灌注后出現(xiàn)嚴(yán)重癱瘓;各時間點(diǎn)HE染色顯示神經(jīng)元不同程
3、度變性壞死;TUNEL染色顯示凋亡神經(jīng)元于再灌注8小時開始出現(xiàn),24小時達(dá)高峰,48小時減少;脊髓組織中再灌注8小時、12小時僅見少量HSP70陽性表達(dá)細(xì)胞,再灌注24小時消失。缺血預(yù)處理組:神經(jīng)功能評分在各時間點(diǎn)明顯高于缺血組(P<0.01),脊髓前角正常神經(jīng)元數(shù)量較缺血組明顯增多(P<0.01),神經(jīng)細(xì)胞凋亡的變化趨勢同缺血組,但凋亡細(xì)胞數(shù)明顯低于同時間點(diǎn)缺血組,脊髓組織中再灌注8小時、12小時可見大量HSP70陽性表達(dá)細(xì)胞,并持續(xù)
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