慢病毒介導(dǎo)Lipin1表達(dá)對(duì)糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變的影響.pdf

1、背景：糖尿病周圍神經(jīng)病變(diabetic peripheral neuropathy, DPN)是糖尿病(diabeticmellitus，DM)最常見的慢性并發(fā)癥之一，其患病率達(dá)50％，是造成糖尿病足和截肢的主要原因，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，目前臨床上尚無有效的治療方法。目前對(duì)DPN發(fā)病機(jī)制的研究多集中在多元醇通路的代謝異常、糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)的積聚、氧化應(yīng)激、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等。脂素(Lipin)由脂素基因(LPIN)表達(dá)產(chǎn)生

2、，是一種新發(fā)現(xiàn)的具有雙向調(diào)控功能的一個(gè)家族，可調(diào)控身體脂肪代謝，主要包括Lipin1、Lipin2和Lipin3。脂素Lipin1作為一種新的脂肪因子，在機(jī)體糖脂代謝中起著重要作用。Lipin1主要表達(dá)于白色脂肪組織及肌肉，同時(shí)也表達(dá)于其他組織如周圍神經(jīng)、肝臟及腎臟。有研究發(fā)現(xiàn)Lipin1缺乏是造成周圍神經(jīng)病變的原因之一，主要機(jī)制在于Lipin1缺乏導(dǎo)致構(gòu)成神經(jīng)外膜的脂肪墊以及雪旺細(xì)胞中的磷脂酸磷酸酯酶活性缺乏，髓磷脂合成減少，神經(jīng)傳導(dǎo)

3、速度減慢。
　　目的：通過構(gòu)建糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠模型，將攜帶Lipin1的慢病毒載體轉(zhuǎn)染糖尿病大鼠，觀察糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)的神經(jīng)電生理及病理形態(tài)學(xué)變化，探討Lipin1對(duì)糖尿病大鼠周圍神經(jīng)早期病變的影響。方法:36只雄性Wistar大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周后給予小劑量（30 mg/kg）鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射，成功誘導(dǎo)其成為2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)大鼠模型，隨機(jī)分為空載體組、

4、Lipin1過表達(dá)組，另選擇12只健康大鼠作為正常對(duì)照組。Lipin1過表達(dá)(LV-Lipin1)組、空載體（LV-control）組分別通過尾靜脈注射lipin1慢病毒載體(5×107 TU)和空慢病毒載體(5×107 TU)，每月1次，連續(xù)2次。8周后對(duì)照觀察各組大鼠血糖(BG)、體質(zhì)量(BW);應(yīng)用甲苯胺藍(lán)染色，通過光鏡及透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)病理形態(tài)學(xué)改變;應(yīng)用免疫組化法測(cè)定Lipin1表達(dá)。數(shù)據(jù)均采用應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件

5、，計(jì)量資料采用(x)±s，多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK法，P＜0.05為差異有統(tǒng)汁學(xué)意義。
　　結(jié)果：①至干預(yù)結(jié)束時(shí)，正常組體質(zhì)量呈生理性正常加重，血糖正常?？蛰d體組大鼠血糖高于正常組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。Lipin1過表達(dá)組血糖、體質(zhì)量較空載體組無顯著差異（P＞0.05）。②糖尿病大鼠成模2月時(shí)，免疫組化觀察坐骨神經(jīng)Lipin1表達(dá)，空載體組較正常對(duì)照組坐骨神經(jīng)縱切面Lipin1表達(dá)量明顯

6、減少;Lipin1過表達(dá)組較空載體組Lipin1表達(dá)量明顯增多。③糖尿病大鼠造模后4w即可出現(xiàn)神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，Lipin1轉(zhuǎn)染后8周，Lipin1過表達(dá)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度較空載體組明顯改善(P＜0.05）。④糖尿病大鼠造模后8w，空載體組較正常對(duì)照組的神經(jīng)纖維直徑、密度、面積均減少，Lipin1過表達(dá)組以上病變較空載體組顯著減輕(P＜0.05)。
　　結(jié)論：⑴實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠成模后4w發(fā)現(xiàn)周圍神經(jīng)病變，隨病程延長(zhǎng)神經(jīng)損傷逐漸加重。⑵