吲哚青綠染色對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞與功能的影響.pdf

1、叫噪青綠染色對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞與功能的影響內(nèi)容提要目的:通過(guò)體外試驗(yàn)和臨床隨訪分析研究不同濃度叫噪青綠(indocyaninegreen[CG)ICG對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RetinalpigmentepitheliumRPE)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(RetinalglialcellRGC)，眼視網(wǎng)膜形態(tài)、功能的影響。方法:(1)觀察測(cè)定ICG在RPE細(xì)胞內(nèi)的吸收和代謝周期。(2)測(cè)定工CG在不同溶劑中溶解的PH值與滲透壓，觀察不同濃度ICG對(duì)兩種

2、視網(wǎng)膜細(xì)胞形態(tài)和功能的的影響。(3)觀察不同濃度工CG對(duì)尸體眼視網(wǎng)膜形態(tài)的影響。(4)RTPCR法測(cè)定ICG對(duì)RPE內(nèi)SOD與Bcl2基因表達(dá)的影響。(5)對(duì)比使用或不使用ICG組高度近視眼黃斑孔患者術(shù)后視功能變化，評(píng)價(jià)工CG對(duì)玻璃體手術(shù)及其預(yù)后的影響。結(jié)果:(1)0.25mgmlICG與RPE細(xì)胞共同培養(yǎng)1小時(shí)后胞漿內(nèi)出現(xiàn)圓形工CG顆粒，隨時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞內(nèi)顆粒增多，24小時(shí)達(dá)到飽和。以后，隨時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞內(nèi)ICG逐漸減少。7天后透射電鏡下

3、顯示胞漿內(nèi)個(gè)別工CG顆粒殘留。RPE細(xì)胞對(duì)0.25mgml工CG的代謝周期約為7天。(2)ICG在不同溶劑中的溶解度不同。ICG處理后，視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞A值降低，損害程度與溶液濃度和作用時(shí)間成正比(P0.05)0(3)隨濃度增加，作用時(shí)間延長(zhǎng)工CG引起尸體眼視網(wǎng)膜由內(nèi)向外各層結(jié)構(gòu)破壞逐漸加重，直至細(xì)胞完全破裂死亡。(4)叫噪青綠聯(lián)合光照光照后細(xì)胞內(nèi)H202和細(xì)胞間的氧自由基表達(dá)明顯增強(qiáng)，強(qiáng)光較中等強(qiáng)度光照組明顯。同

4、時(shí)，SOD基因表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)增加，各時(shí)段基因表達(dá)差異有極顯著性意義(P0.01)，在30分鐘達(dá)高峰，以后下降。(5)工CG輔助內(nèi)界膜剝離和術(shù)后眼底激光治療可提高高度近視眼黃斑孔視網(wǎng)膜脫離的一次手術(shù)成功率。但術(shù)后OCT掃描發(fā)現(xiàn)ICG組裸露型多見(jiàn)，視網(wǎng)膜厚度變薄(pO.05)，可能與工CG對(duì)RPE和神經(jīng)上皮的毒性有關(guān)。結(jié)論:(1)RPE細(xì)胞對(duì)工CG代謝緩慢。(2)低濃度ICG溶液對(duì)RPE和RGC細(xì)胞形態(tài)無(wú)影響，但能影響細(xì)胞內(nèi)線粒體酶的活性。

5、(3)不同濃度工CG可引起視網(wǎng)TheeffctofindocyaninegreenstainonretinalcellsandfunctionAbstractObjective:TostudytheeffectsofICGonthestructuresandfunctionsofhumanretina，retinalpigmentepithelialcellsandretinalglialcellthroughMethods:serie

6、sofinvitroexperimentsandclinicfollowup.(1)ToinvestigateTomeasurethePHvaluemetabolismcycleofICGinREPcells.osmoticpressureofICGindifferentventandevaluatetheaffectionofICGoncellsstructureand、、月了1..J9白02萬(wàn)、5function.(3)Tostud

7、ytheeffectsofdifferentconcentrationoncorpseretina.(4)Reversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR)wasemployedtodeterminedtheexpressionofSODandBcl2gene.(5)Comparetheresultsofpatientsvisualfunctionaftersurgerytoevalua

8、teeffectsofICGonthevitrectomyanditsprognosis.Results:(1)CocultureRPEwith0.25mgmlICGfor1hourroundICGparticlesappearsinthecytoplasmtheparticlesincreasetillitreachedsaturationat24hoursthendecrease.Remnantparticlesstillshows

9、inthecytoplasmundertransmissionelectronmicroscopeafter7days.Themetabolismcycleof0.25mgmlICGbyRPEisabout7days.(2)ThetoxicityofICGindifferentsolventisvarious.AfterICGtreatmenttheAvalueofRGCandRPEcellsdecreasethedegreeofthe

10、destructionisdependedontheconcentrationofthesolutionandthedurationofthecontact(P0.05).(3)IncreasetheconcentrationofsolutionanddurationofitscontactwiththecadavericretinaThedestructionoftheretinafrominnertoouterlayerinduce