S1P對視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子的影響.pdf

1、目的:探討1-磷酸鞘氨醇(S1P)對ARPE-19細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子的影響以及細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路在其中的作用。
　　方法:ARPE-19細(xì)胞中S1P1-5受體的表達(dá)通過RT-PCR和realtime PCR進(jìn)行檢測。ARPE-19細(xì)胞經(jīng)TNF-α、S1P、百日咳毒素(Pertussiutoxin，PTX)或一系列激酶抑制劑處理后，我們采用ELISA法測定ARPE-19細(xì)胞上清液中IL-8、IL-6和MCP-1的質(zhì)量濃度水平，以及采

2、用Western-Blot方法測定ARPE-19細(xì)胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激酶信號傳導(dǎo)分子的活化情況和S1P3受體的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:ARPE-19細(xì)胞表達(dá)所有已知的S1P1-5受體。此外，外源性的S1P促進(jìn)ARPE-19細(xì)胞分泌IL-8，且在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量和時間依賴方式，但S1P并不能促進(jìn)IL-6和MCP-1的分泌。S1P誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞分泌IL-8受PTX、ERK1/2和p38MAPK的調(diào)控。有趣的是，當(dāng)ARPE-19

3、細(xì)胞被TNF-α刺激后，能上調(diào)ARPE-19細(xì)胞S1P3受體的表達(dá)，而且還能增加S1P促細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子IL-8和IL-6，但對MCP-1沒有影響。
　　結(jié)論:本研究表明，S1P能顯著促進(jìn)ARPE-19細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子。ERk1/2、p38 MAPK和Gi蛋白依賴通路是S1P促進(jìn)ARPE-19細(xì)胞分泌的重要信號成分。此外，這些結(jié)果還證明在眼部炎癥中，S1P對RPE細(xì)胞的刺激作用可能通過對白細(xì)胞功能的調(diào)控來發(fā)揮致炎作用。