含碘吲哚青綠與無碘吲哚青綠對(duì)兔視網(wǎng)膜影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 探討視網(wǎng)膜內(nèi)界膜剝除術(shù)中玻璃體腔內(nèi)使用含碘吲哚青綠(indocyaninegreen，ICG)和無碘吲哚青綠(infracyanine green，ifCG)輔助染色內(nèi)界膜對(duì)視網(wǎng)膜影響的差異。 方法 選取健康青紫藍(lán)兔48只，隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為BSS組、ifCG組、ICG組、BSS+L組、ifCG+L組及ICG+L組。各組動(dòng)物均以左眼為實(shí)驗(yàn)眼，行經(jīng)扁平部玻璃體切除術(shù)后，BSS組玻璃體腔內(nèi)注入無菌手

2、術(shù)平衡液(balancedsalt solution，BSS)0.1 ml，作為對(duì)照組；ifCG組玻璃體腔注入0.1 ml 0.5％ifCG，染色黃斑部視網(wǎng)膜內(nèi)界膜2 min后，BSS灌洗玻璃體腔；ICG組玻璃體腔注入0.1ml 0.5％ICG，染色視網(wǎng)膜黃斑部?jī)?nèi)界膜2 min后，BSS灌洗玻璃體腔； BSS+L組、ifCG+L組、ICG+L組分別在BSS組、ifCG組、ICG組的手術(shù)操作基礎(chǔ)上，即染色視網(wǎng)膜并灌洗玻璃體腔后，用玻璃體切

3、除術(shù)中應(yīng)用的眼內(nèi)導(dǎo)光纖維以5800mW/cm<'2>照射視網(wǎng)膜黃斑部10 min。術(shù)后1 d、14 d分別行組織病理學(xué)檢查、透射電子顯微鏡檢查和閃光視網(wǎng)膜電圖檢查。 1．組織病理學(xué)檢查：術(shù)后1 d及14 d，每組動(dòng)物中隨機(jī)各選2只處死，眼球取材后經(jīng)固定、脫水、透明、包埋、切片后，行蘇木素．伊紅染色。隨機(jī)選取切片，觀察視網(wǎng)膜形態(tài)改變，測(cè)量并比較各組間的黃斑部視網(wǎng)膜厚度。 2．透射電子顯微鏡檢查：術(shù)后1 d及14 d，每組動(dòng)

4、物中隨機(jī)各選2只處死，取黃斑部視網(wǎng)膜組織經(jīng)固定、脫水、浸透、包埋、半薄切片染色定位后，制作110nm超薄切片，醋酸雙氧鈾和枸櫞酸鉛雙重染色后，透射電子顯微鏡下觀察視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)的改變。 3．閃光視網(wǎng)膜電圖檢查(flash electroretinogram，fERG)：術(shù)后1d及14d，每組動(dòng)物中隨機(jī)選取4只散大瞳孔暗適應(yīng)后分別行雙眼fERG檢查。每眼重復(fù)檢。查5次，分別記錄fERG中雙眼b波波幅和振蕩電位(oscilatory

5、 potentials，OPs)，以左眼與右眼測(cè)量數(shù)值平均數(shù)的比值作為左眼視網(wǎng)膜功能的指標(biāo)，比較各組間此比值的差異。 結(jié)果 1．眼組織病理學(xué)檢查： (1)術(shù)后1 d：與BSS組相比，ifCG組和ICG組的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和神經(jīng)纖維層輕度水腫，內(nèi)核層外核層細(xì)胞排列較紊亂，視網(wǎng)膜厚度均增加(P<0.05)，但ifCG 組與ICG組之間無明顯形態(tài)區(qū)別和視網(wǎng)膜厚度的差異(P>0.05)。與單純?nèi)旧M(ifCG組、ICG組)相

6、比，染色聯(lián)合光照組(ifCG+L組、ICG+L組)神經(jīng)纖維層空泡變性增加，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞明顯水腫，視網(wǎng)膜厚度增加(P<0.05)。 (2)術(shù)后14 d：與BSS組相比，ifCG組和ICG組神經(jīng)纖維層空泡化，外核層明顯變薄，各層排列欠規(guī)整，視網(wǎng)膜厚度均較BSS組增加(P<0.05)。但ifCG組與ICG組之間無明顯形態(tài)區(qū)別和視網(wǎng)膜厚度的差異(P>0.05)。與單純?nèi)旧M(ifCG組、ICG組)相比，染色聯(lián)合光照組(ifCG+L組、IC

7、G+L組)神經(jīng)纖維層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層萎縮程度增加，外核層排列更加紊亂，視網(wǎng)膜厚度降低(P<0.05)。 2．透射電子顯微鏡檢查： (1)術(shù)后1 d：BSS組各層細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰規(guī)整；ifCG組外核層細(xì)胞核間隙見少量空泡，外節(jié)排列較整齊，色素上皮細(xì)胞內(nèi)含有較多的層狀結(jié)構(gòu)。ICG組外核層輕度變稀疏，外節(jié)少量膜盤排列欠規(guī)整，色素上皮細(xì)胞內(nèi)含有較多的層狀結(jié)構(gòu)。Bss+L組外核層排列整齊，外節(jié)見輕度腫脹，色素上皮細(xì)胞內(nèi)含有大量的層狀結(jié)構(gòu)

8、。ifCG+L組外核層細(xì)胞腫脹，細(xì)胞質(zhì)濃縮，外節(jié)排列不規(guī)整，色素上皮細(xì)胞內(nèi)含有大量的層狀結(jié)構(gòu)。lCG+L組外核層細(xì)胞間質(zhì)腫脹變寬，外節(jié)排列欠規(guī)整，色素上皮層輕度水腫。 ICG組、ifCG組較BSS組有明顯的超微結(jié)構(gòu)改變，而且ICG組的超微結(jié)構(gòu)改變較ifCG組明顯；眼內(nèi)光照后，BSS+L組、ifCG+L組和ICG+L組的視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)改變依次明顯，而且分別較BSS組、ifCG組、ICG組改變更為明顯。 (2) 術(shù)后14 d

9、：BSS組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)依舊清晰規(guī)整。ifCG組外核層細(xì)胞核間隙仍見少量空泡，細(xì)胞間隙增大，外節(jié)膜盤排列整齊，色素上皮細(xì)胞內(nèi)含有較多的空泡樣結(jié)構(gòu)。ICG組外核層稀疏變薄，細(xì)胞核間隙增大，外節(jié)稀疏變薄，色素上皮細(xì)胞內(nèi)有空泡存在。BSS+L組外核層內(nèi)少量空泡，外節(jié)可見個(gè)別空泡存在，色素上皮細(xì)胞高度均一。ifCG+L組外核層細(xì)胞指狀稀疏，膠質(zhì)細(xì)胞增殖，外節(jié)部分膜盤裂隙增大，色素上皮細(xì)胞內(nèi)有空泡存在。ICG+L組外核層細(xì)胞指狀稀疏，膠質(zhì)細(xì)胞增殖，外

10、節(jié)排列不規(guī)整，色素上皮細(xì)胞內(nèi)有空泡存在。 ICG組、ifCG組較BSS組仍然有明顯的超微結(jié)構(gòu)改變；但各組間差異變??；聯(lián)合眼內(nèi)光照后，染色組的超微結(jié)構(gòu)改變更加明顯，各組比較結(jié)果與1 d時(shí)相似，但差異更小。 3．閃光視網(wǎng)膜電圖檢查： (1)術(shù)后1 d：各組暗適應(yīng)fERG b波波幅比值和Opa比值的染色因素之間比較顯示，ICG染色的兩組(ICG組，ICG+L組)較ifCG染色的兩組(ifCG組，ifCG+L組)降低，且

11、均小于相應(yīng)的兩個(gè)對(duì)照組(BSS組、BSS+L組)；而相應(yīng)的未光照組和經(jīng)過光照組的組間比較，經(jīng)過光照的3個(gè)組均較其對(duì)應(yīng)組降低，差異有顯著意義。染色因素和光照因素沒有明顯的交互影響。 (2) 術(shù)后14 d：各組暗適應(yīng)fERG b波波幅比值和Ops比值的染色因素之間比較顯示，ICG染色的兩組(ICG組，ICG+L組)與ifCG染色的兩組(ifCG組，ifCG+L組)之間差異無顯著意義，均較相應(yīng)的兩個(gè)對(duì)照組(BSS組、BSS+L組)降低