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1、骨骼肌損傷是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的常見(jiàn)病,修復(fù)后容易再次損傷。本研究將從組織形態(tài)學(xué)、生物力學(xué)和mRNA層面了解黃芪丹參復(fù)方制劑中的重要成分黃芪皂甙和丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷的作用效果。
第一部分,黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后骨骼肌組織形態(tài)的影響
目的:觀(guān)察黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌鈍挫傷后骨骼肌組織形態(tài)的影響。
方法:84只雄性wistar大鼠隨機(jī)分為六組,其中五個(gè)干預(yù)組(每組16只)
2、和一個(gè)正常對(duì)照組(共4只)。用打擊裝置將干預(yù)組大鼠雙側(cè)腓腸肌中段造成鈍挫傷模型,在損傷局部分別注射黃芪皂甙、丹參酮ⅡA、黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合液、黃芪丹參混合液及生理鹽水,分別于損傷后第4天、7天、14天和28天,進(jìn)行雙側(cè)腓腸肌損傷部位取材。正常對(duì)照組于第28天進(jìn)行雙側(cè)腓腸肌取材。經(jīng)HE染色觀(guān)察骨骼肌纖維直徑(橫斷面),經(jīng)Masson染色觀(guān)察損傷處纖維疤痕組織面積(縱切面)。
結(jié)果:(1)各組不同時(shí)間點(diǎn)所測(cè)得的骨骼肌纖維直徑無(wú)
3、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)各藥物干預(yù)組纖維疤痕面積均較生理鹽水組明顯減小,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組的纖維疤痕面積小于黃芪皂甙組和丹參酮ⅡA組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組與黃芪丹參組結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:在急性骨骼肌鈍挫傷修復(fù)過(guò)程中,黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)損傷部位骨骼肌纖維的直徑?jīng)]有明顯影響,能減少損傷區(qū)域的纖維疤痕組織形成。
第二部分,黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后生物力學(xué)指標(biāo)的影響
目的:觀(guān)察黃芪
4、皂甙和丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后生物力學(xué)指標(biāo)的影響。
方法:用打擊裝置將80只雄性Wistar大鼠右側(cè)腓腸肌中段造成鈍挫傷模型,隨機(jī)分為五組,在損傷局部分別注射黃芪皂甙、丹參酮ⅡA、黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合液、黃芪丹參混合液及生理鹽水。于損傷后第14天、2l天、35天和56天,完整分離雙側(cè)腓腸肌,肌肉兩端均帶骨塊。測(cè)試大鼠雙側(cè)腓腸肌的斷裂強(qiáng)度和拉伸率,并將每只大鼠的傷側(cè)數(shù)值與健側(cè)數(shù)值之比作為參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較各組大
5、鼠的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
結(jié)果:(1)從傷后第21天開(kāi)始,各干預(yù)組斷裂強(qiáng)度比值均明顯高于生理鹽水組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組明顯高于黃芪皂甙組和丹參酮ⅡA組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組和黃芪丹參組結(jié)果基本一致。(2)從傷后第21天開(kāi)始,各干預(yù)組最大拉伸率比值均明顯高于生理鹽水組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組明顯高于黃芪皂甙組和丹參酮ⅡA組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組和黃芪丹參組結(jié)果基本一致。
結(jié)論:在急性骨骼肌鈍挫傷修復(fù)過(guò)程中,黃芪皂
6、甙、丹參酮ⅡA能提高損傷骨骼肌的斷裂強(qiáng)度和最大拉伸率,改善損傷骨骼肌的生物力學(xué)特性,但單方的治療效果弱于其混合制劑和黃芪丹參復(fù)方制劑。
第三部分,黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌急性鈍挫傷后胚胎型肌球蛋白重鏈及波形蛋白mRNA表達(dá)的影響
目的:觀(guān)察黃芪皂甙、丹參酮ⅡA對(duì)大鼠骨骼肌鈍挫傷后胚胎型肌球蛋白重鏈(embryonicmyosinheavychain,MHC-emb)及波形蛋白(vimentin)mRNA表達(dá)的
7、影響。
方法:用打擊裝置將120只雄性Wistar大鼠右側(cè)腓腸肌中段造成鈍挫傷模型,隨機(jī)分為五組,在損傷局部分別注射黃芪皂甙、丹參酮ⅡA、黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合液、黃芪丹參混合液及生理鹽水。于損傷后第1、4、7、14、28和42天,取損傷處肌肉標(biāo)本。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(realtimequantitativePCR)方法分析MHC-emb及波形蛋白mRNA的表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)在骨骼肌急性鈍挫傷修復(fù)早
8、期,各組MHC-embmRNA和波形蛋白mRNA表達(dá)量均顯著升高,分別于第7-14天和第4天達(dá)到高峰,然后下降。(2)各干預(yù)組MHC-embmRNA表達(dá)水平明顯高于生理鹽水組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組和黃芪丹參組更高于黃芪皂甙組和丹參酮ⅡA組。(3)各干預(yù)組波形蛋白mRNA表達(dá)水平明顯低于生理鹽水組,黃芪皂甙丹參酮ⅡA混合組和黃芪丹參組更低于黃芪皂甙組和丹參酮ⅡA組。
結(jié)論:在急性骨骼肌鈍挫傷修復(fù)過(guò)程中,黃芪皂甙、丹參酮ⅡA能
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