HPV及高危亞型與卵巢上皮癌發(fā)病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:探討HPV感染以及其高危亞型HPV16和HPV35與卵巢上皮癌發(fā)病情況之間的關(guān)聯(lián)性，尋找卵巢上皮癌發(fā)病的相關(guān)因素，為卵巢上皮癌的預(yù)防提供客觀依據(jù)。
　　方法:運用PCR技術(shù)擴增從甲醛固定石蠟包埋組織中提取的DNA:(1)提取石蠟包埋的卵巢組織DNA:625例石蠟組織標(biāo)本分為正常卵巢組、良性腫瘤組和癌變卵巢三組:經(jīng)二甲苯脫蠟，使用DNA提取試劑提取出組織DNA。(2)運用PCR技術(shù)檢測HPV韻感染率:①將提取的DNA作為模板，

2、用擴增目的片段(450bp)的引物PGMY09/11進行初步擴增;②選取第一步中PGMY擴增結(jié)果為陰性的產(chǎn)物作為模板，用擴增的目片段較短(150bp)的引物GP5+/6+進行第二次擴增。(3)亞型選擇:將PGMY和GP5+/6+擴增結(jié)果為陽性的標(biāo)本，再應(yīng)用PCR技術(shù)從中篩選出高危型HPV16和HPV35，觀察高危亞型16和35各占比值。
　　結(jié)果:(1)從石蠟包埋組織中提取出DNA。(2)成功建立了HPV的巢式PCR和降落PCR擴

3、增體系。(3)在癌變卵巢組織中HPV的陽性檢出率顯著高于正常對照組和良性腫瘤組，同時良性腫瘤組的陽性檢出率也高于正常對照組，44.32％的標(biāo)本(95％CI=40.48-48.22％)使用PGMY09/11和GP5+/6+兩對引物的巢式PCR擴增結(jié)果呈陽性，癌變組中63.35％（95％CI=58.95-68.65％）的樣本PCR擴增結(jié)果呈陽性，正常組織和卵巢良性腫瘤組織中擴增結(jié)果陽性分別占有17.64％(95％CI=12.43-22.87

4、％)和37.37％(95％CI=29.38-45.42％)，各組的陽性率差異有統(tǒng)計意義（P＜0.005P＜0.005）。(4)對HPV陽性組織中的HPV16和HPV35兩種高危亞型進行檢測，癌變組HPV16占較大比值，共有53.97％（95％CI=45.78-61.8％）為HPV16，與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.005）。HPV陽性標(biāo)本中僅3.97％(95％CI=1.68-6.26％)為HPV35，癌變組與正常組比較差異有