甲氧基聚乙二醇修飾人紅細(xì)胞稀有血型抗原的研究.pdf

1、該研究探討了使用化學(xué)材料甲氧基聚乙二醇(mPEG)修飾人紅細(xì)胞稀有血型抗原,通過對比實(shí)驗(yàn)從三種攜不同端基的mPEG中選擇出修飾效果好的mPEG-BTC,并優(yōu)化了mPEG修飾紅細(xì)胞血型抗原的條件.在此基礎(chǔ)上,研究了mPEG-BTC修飾紅細(xì)胞后對紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能的影響,包括滲透脆性、自身溶血性、乙酰膽堿酯酶活性、膽固醇含量、ATP含量、2,3-DPG含量和變形性及形態(tài).根據(jù)mPEG修飾紅細(xì)胞改變了紅細(xì)胞的表面性質(zhì)和電荷作用,采用雙水相系統(tǒng)對修

2、飾和未修飾的紅細(xì)胞進(jìn)行分離及修飾比例的評價,并觀察了mPEG-BTC修飾紅細(xì)胞在MAP營養(yǎng)液中的保存期,以及mPEG-BTC與紅細(xì)胞膜結(jié)合的穩(wěn)定性.實(shí)驗(yàn)證明,較低濃度(1.0mmol/L)和mPEG-BTC,較短的時間內(nèi)(1h),可以有效遮蔽紅細(xì)胞Kidd血型系統(tǒng)的Jk<'a>和Jk<'b>抗原、Kell血型系統(tǒng)的k抗原、P血型系統(tǒng)的P<,1>抗原等稀有血型抗原.mPEG-BTC修飾后紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能各項(xiàng)指標(biāo)正常.在21天內(nèi),在MAP液中

3、保存的修飾前后的紅細(xì)胞各項(xiàng)指標(biāo)沒有顯著性差異,并且都在正常值范圍內(nèi).mPEG-BTC修飾前后的RBC在昆明小鼠體內(nèi)存活期基本相同,半壽期均約為14天.mPEG-BTC與紅細(xì)胞膜結(jié)合穩(wěn)定,修飾后的紅細(xì)胞保存28天,未檢測到mPEG的脫離.研究論文還初步觀察了mPEG-BTC對臨床疑難配血的供體細(xì)胞的修飾效果,臨床配血要求血型一致才能供病人使用,但實(shí)際工作中經(jīng)常遇到即使ABO血型完全一致的紅細(xì)胞和血清也會出現(xiàn)凝集反應(yīng),難以找到合適的血液供病

4、人使用.特別是那些歷經(jīng)反復(fù)輸血的病人,他們的血清中可能存在其他稀有血型的抗體,因此難以找到合適的供體血液.在探討了mPEG-BTC修飾紅細(xì)胞稀有血型抗原的基礎(chǔ)上,該研究收集了29例臨床配血困難及含高效價抗體的血清,用mPEG-BTC修飾供體紅細(xì)胞,再將mPEG-BTC修飾后的紅細(xì)胞與疑難配血患者的血清混合,用聚凝胺和抗人球蛋白法均未檢測到凝集反應(yīng).說明mPEG-BTC修飾紅細(xì)胞后,不會與臨床配血困難病例血清中的抗體發(fā)生反應(yīng),可以解決臨床