mPEG-SPA修飾人紅細(xì)胞RhD血型抗原的研究.pdf

1、目的: 觀察mPEG-SPA(甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亞胺丙酸酸酯)對(duì)人紅細(xì)胞血型RhD抗原修飾的效果，并探討mPEG-SPA修飾的可行性。 方法: 采用mPEG-SPA修飾人紅細(xì)胞血型RhD抗原，并觀察其對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能、變形能力、沉降率和常規(guī)指標(biāo)的影響。 結(jié)果: (1)2.0mmol/L mPEG-SPA可以有效地遮蔽紅細(xì)胞表面RhD抗原。 (2)用掃描電鏡分別觀測(cè)mPEG修飾組

2、和未修飾組紅細(xì)胞形態(tài)，發(fā)現(xiàn)均正常。 (3)在4℃條件下保存14天和在37℃條件下保存2天，mPEG與被修飾紅細(xì)胞可以穩(wěn)定結(jié)合。 (4)2.0mmol/L mPEG-SPA修飾對(duì)人紅細(xì)胞在NaCL中滲透脆性無(wú)明顯影響。 (5)在48小時(shí)37℃溫育后，未修飾組和修飾組的自身溶血率分別為(1.32±0.32)％和(2.27±0.28)％。結(jié)果表明，與未修飾組相比，mPEG-SPA修飾確實(shí)導(dǎo)致自發(fā)性溶血的增加(P<0.0

3、5)，但仍在正常范圍內(nèi)。 (6)未修飾組和修飾組紅細(xì)胞膜膽固醇含量分別為(0.1±0.06) g/L和(0.1±0.03)g/L；乙酰膽堿酯酶活性分別為(29.68±4.16) U/mg和(27.88±5.09)U/mg；Na+-K+ATP酶活性為(5.14±1.32)U/mg和(4.83±1.27) U/mg；2，3-DPG含量分別為(65.13±13.98) mmol/L和(71.00±12.88) mmol/L，兩組均無(wú)顯

4、著區(qū)別(P>0.05)。 (7) mPEG-SPA修飾后的紅細(xì)胞沉降速度變慢，修飾前后紅細(xì)胞沉降率分別為(8.00±3.82) mm/H和(2.75±2.05) mm/H(P<0.05)，但仍在正常值范圍之內(nèi)。修飾前后的紅細(xì)胞的最大變形指數(shù)分別為(0.98±0.29)和(0.98±0.18)(P>0.05)，均大于0.51。 (8)修飾組的平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)均高于未修飾組(

5、P<0.05)。平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)與未修飾組無(wú)顯著差異(P>0.05)。這些結(jié)果均在正常值范圍之內(nèi)。 結(jié)論: 2.0mmol/L的mPEG-SPA在pH8.0室溫條件下可以有效遮蔽紅細(xì)胞表面RhD抗原，且與紅細(xì)胞結(jié)合牢固。結(jié)果還顯示了mPEG-SPA的修飾對(duì)紅細(xì)胞的滲透脆性、自身溶血率、紅細(xì)胞膜膽固醇含量、紅細(xì)胞膜乙酰膽堿酯酶活性、紅細(xì)胞膜Na+-K+ATP酶活性、2，3-DPG含量、