中期因子和血管內(nèi)皮生長因子在乳腺癌中的表達及意義.pdf

1、背景與目的： 乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率每年以3％-8％的速度增加，其死亡率已占女性惡性腫瘤首位，世界衛(wèi)生組織將乳腺癌列為威脅女性健康的“頭號殺手”。與其他惡性腫瘤一樣，乳腺癌同樣具有侵襲與轉移的特征。而惡性腫瘤的侵襲性與轉移性直接影響到患者的生存與預后。 腫瘤侵襲、轉移的機制非常復雜，腫瘤細胞的侵襲和轉移是個多階段、多步驟、多因素、多基因的發(fā)展過程，是腫瘤細胞與機體(宿主)雙方相互作用的結果。20世紀70

2、年代初,Folkman等就提出“腫瘤的生長依賴血管形成”，腫瘤及其轉移物的生長、維持必須有新生血管的形成來維持，新生的血管網(wǎng)不僅為腫瘤的生長提供養(yǎng)料及氧氣，運走代謝產(chǎn)生的廢物，而且還以旁分泌的形式刺激腫瘤的生長，并促進腫瘤細胞進入血液循環(huán)，向其它組織器官浸潤轉移。如果阻斷新生血管的形成，腫瘤細胞將趨于壞死。而腫瘤血管生成受到正負兩方面因子的調(diào)控：血管生成刺激因子和血管生成抑制因子。 中期因子(Midkine,MK)是近年來發(fā)現(xiàn)的

3、一種重要的血管生成誘導因子，因起初在孕中期小鼠胚胎腎臟發(fā)現(xiàn)其大量表達而得名。研究表明：MK對腫瘤新生血管形成具有明顯的調(diào)控作用。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialialggrowthfactor,VEGF)是一種重要的促血管生長因子，在多種正常組織細胞和腫瘤細胞中均有表達，但是其表達水平卻差異很大。微血管密度(Microvesseldensity,MVD)是衡量血管生成的定量指標。CD34是特異性很強的血管內(nèi)皮細胞

4、標記物，目前可用來檢測MVD。 本試驗通過免疫組化方法檢測中期因子(midkine,MK)和血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialialgrowthfactor,VEGF)、CD34在乳腺癌組織的表達情況并與癌旁正常乳腺組織和乳腺良性腫瘤組進行比較，分析MK及VEGF與腫瘤間質(zhì)血管新生的關系，探討MK、VEGF在乳腺癌組織中的表達以及在乳腺癌的發(fā)生、浸潤和轉移中的作用及與腫瘤血管生成的關系及臨床病理學意義。為乳

5、腺癌的發(fā)生和預后判斷提供參考依據(jù)。 材料與方法： (1)組織標本來源于我院乳腺中心2001年2月至2002年9月經(jīng)手術切除，并經(jīng)病理證實標本，術前均未放療及化療。所有標本均經(jīng)10％甲醛固定，常規(guī)脫水后石蠟包埋。共選取66例乳腺癌標本、20例距腫瘤5cm以上的切緣正常乳腺組織標本及20例乳腺良性腫瘤組織標本。 (2)免疫組化SP法(streptavidinperoxidasemethod)檢測MK、VEGF、CD3

6、4在乳腺癌、癌旁正常乳腺及良性乳腺腫瘤組織中的表達情況并計數(shù)MVD。ER、PR為乳腺癌術后常規(guī)檢查項目。 (3)統(tǒng)計工具為SPSS12.0版軟件包，統(tǒng)計方法采用x2檢驗、t檢驗、方差分以及spearm等級相關分析，Kaplan-Meier方法分析生存率，并經(jīng)Log-rank檢驗，以p<0.05作為有統(tǒng)計學意義的判定標準。 結果： (1)MK、VEGF蛋白表達及MVD值在乳腺癌組織、乳腺良性腫瘤組織及癌旁正常乳腺組

7、織中的比較。 MK蛋白在乳腺癌組織中表達率為72.4％、在癌旁正常乳腺組織中及良性腫瘤組織中表達率皆為0；VEGF蛋白在乳腺癌組織表達率68.1％、在正常乳腺組織中及良性腫瘤組織中表達率分別為15.0％、25％。乳腺癌組MK、VEGF表達率顯著高于癌旁正常乳腺組及良性腫瘤組(p<0.001)。癌旁正常乳腺組及良性腫瘤組MK、VEGF表達率比較差異皆無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。 CD34染色呈棕黃色，陽性物質(zhì)位于血管內(nèi)皮

8、細胞胞漿及胞膜。乳腺癌組織中的MVD值為83.97±17.10、癌旁正常乳腺組織中的MVD值為45.75±10.76，乳腺良性腫瘤的MVD值48.32±12.35，三組比較差別具有統(tǒng)計學意義(p<0.001)。乳腺癌組織中的MVD值顯著高于正常乳腺組織及乳腺良性腫瘤。而癌旁正常乳腺組織和乳腺良性腫瘤比較差別無統(tǒng)計學意義。 (2)MK、VEGF蛋白表達與乳腺癌臨床病理特征的關系 MK、VEGF蛋白在乳腺癌中的表達與腫瘤大小

9、，腋淋巴結轉移狀況，臨床分期有明顯關系，而與年齡，組織學類型，組織學分級，ER,PR表達是否陽性無關。 (3)MK、VEGF蛋白表達和MVD值的關系 MK表達陽性組及陰性組MVD均值分別為88.32±17.67、72.39±7.75，MK表達陽性MVD值明顯高于MK表達陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.001)。VEGF表達陽性組及陰性組MVD均值分別為88.62±17.31、74.00±11.79,陽性組MVD明顯高于

10、陰性組。差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。 乳腺癌組織中MK、VEGF均為陽性表達時的MVD均值為89.12±16.25，MK陽性而VEGF陰性時的MVD均值為83.51±17.20，MK陰性而VEGF陽性時MVD均值為80.26±15.29，MK、VEGF均為陰性表達時的MVD值為69.23±15.57。統(tǒng)計學結果表明二者共陽性表達時的MVD均值顯著高于其它各組的MVD值，MK、VEGF均為陰性表達時的MVD值最小，差異有統(tǒng)計

11、學意義(F＝10.217p=0.026)。 (4)MK、VEGF的表達的相關性分析 66例乳腺癌組織中MKVEGF表達共陽性者37例，MK和VEGF表達共陰性者10例，MK表達陽性而VEGF表達陰性者11例，MK表達陰性而VEGF表達陽性者8例，表達一致率為71.21％(47/66)，Spearman等級相關分析表明二者之間表達呈正相關(r＝0.312,p=0.011)。 (5)MK、VEGF的表達與預后的關系

12、 乳腺癌MK表達陽性組和陰性者組復發(fā)轉移率分別為41.6％、11.1％。陽性組顯著高于陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；VEGF表達陽性組和陰性者組復發(fā)轉移率分別為42.2％、14_3％，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。MK陽性組的無病生存期和總生存期均比表達陰性者明顯縮短，差異有顯著性，(分別為X2=5.32,P=0.0211；X2=4.98,P=0.0256)。VEGF的表達陽性的無病生存期和總生存期亦較表達陰性者者

13、明顯縮短，差異有顯著性((分別為X2＝5.12，P=0.0236；X2=4.53，P=0.0334)。 結論： (1)MK、VEGF蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達顯著高于正常乳腺組織及乳腺良性腫瘤組織，而正常乳腺組織、良性腫瘤組織比較差異無統(tǒng)計學意義。 (2)MK、VEGF表達水平與乳腺癌的臨床分期、腫瘤大小及淋巴結轉移明顯相關；與年齡、組織類型、病理分級、ER、PR表達無關。 (3)MK、VEGF與腫瘤新