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文檔簡介
1、目的:探索以人臍帶沃頓膠制備新型生物軟骨支架的方法,及其作為軟骨組織工程支架載體的可行性。對不同工藝條件下所制備的支架進行大體外形和顯微結(jié)構(gòu)觀察,并對其理化性能進行檢測,研究何種工藝條件下制備的支架最符合軟骨支架的理化性能要求,為新型生物軟骨支架的研究提供實驗依據(jù)。
方法:從新鮮胎兒臍帶中分離出沃頓膠組織,分6組(A1、A2、A3、B1、B2、B3)經(jīng)酶消化法聯(lián)合物理凍融法脫細胞,再經(jīng)冷凍干燥成型法制作軟骨支架。其中,各組
2、的消化時間和預凍溫度依次為:30min、-196℃(A1組),30min、-80℃(A2組),30min、-20℃(A3組),1h、-196℃(B1組),1h、-80℃(B2組),1h、-20℃(B3組)。并行支架大體外形、HE染色及SEM照片觀察,并對支架的孔徑、孔隙率、密度、溶脹率、降解率等進行測定。
結(jié)果:得到的支架大體觀察為表面多孔隙的白色疏松海綿泡沫樣物質(zhì),在HE染色及SEM照片下觀察呈多孔網(wǎng)狀交織的三維結(jié)構(gòu),孔
3、隙分布較均勻,材料內(nèi)空隙相互連通。各組支架均脫細胞完全,經(jīng)30min消化的各組消化良好,而經(jīng)1h消化的各組出現(xiàn)消化過度現(xiàn)象,孔壁完整性及連續(xù)性欠佳。隨預凍溫度的升高,各組支架孔徑、孔隙率、吸水率及降解率變大,密度減小。
結(jié)論:人臍帶沃頓膠可制備出呈三維多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、孔隙相互連通的生物軟骨支架。其中,經(jīng)30min消化、-80℃預凍制備的沃頓膠生物軟骨支架去細胞完全,孔壁完整性滿意,有效孔徑、孔隙率、密度、吸水率及降解率等均附
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