白藜蘆醇對囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子的激活作用.pdf

1、白藜蘆醇（3，5，4'，-三羥基二苯乙烯）屬于天然多酚類化合物，也是一種植物抗毒素當(dāng)紅葡萄、桑樹、花生等植物受到生物或非生物脅迫（紫外照射、真菌感染等）時(shí)，植物能夠自身分泌這種抗毒素起到保護(hù)植物的作用。白藜蘆醇具有抗氧化、抗突變、化學(xué)預(yù)防、抗炎、抗癌等對人體健康有利的生物活性而受到廣泛關(guān)注。白藜蘆醇也被認(rèn)為是降低因攝取大量的高脂、高熱量食物而引發(fā)心血管疾病的原因之一。在2005年，Blumenstein等人發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇可以刺激T84細(xì)

2、胞cAMP依賴的氯離子分泌，也可以刺激小鼠腸粘膜中的陰離子分泌。以此為基礎(chǔ)，他們提出了由某些植物中多酚引發(fā)的嚴(yán)重腹瀉可能是cAMP水平提高刺激氯離子分泌造成的。最近，Alexander等人證實(shí)白藜蘆醇可以在小鼠鼻中隔軟骨細(xì)胞( MNSE)和人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞(HSNE)中增強(qiáng)上皮細(xì)胞介導(dǎo)的氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)活性。到目前為止，雖然白藜蘆醇潛在的作用靶點(diǎn)有很多，但是由白藜蘆醇介導(dǎo)的氯離子分泌機(jī)制仍然不明確。
　　囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(c

3、ystic fbrosis transmembrane conductance regulator，CFTR)是ATP結(jié)合蛋白家族成員，主要在所有哺乳動物與分泌吸收相關(guān)組織，如氣管、腸道、生殖道等的上皮細(xì)胞上表達(dá)，參與氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)、對體內(nèi)液體轉(zhuǎn)運(yùn)起至關(guān)重要的作用。它是液體分泌的主要通道，經(jīng)證實(shí)在激活劑刺激時(shí)CFTR是氯離子分泌的最終通路。因此推測白藜蘆醇可以激活CFTR氯離子通道活性。
　　本實(shí)驗(yàn)通過細(xì)胞熒光測定模型、短路電流以及膜

4、片鉗等技術(shù)檢測了白藜蘆醇對野生型和突變型CFTR氯離子通道的激活作用，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠以劑量依賴的方式激活野生型和突變型CFTR氯離子通道的活性，該活性可被CFTR特異性抑制劑CFTRinh-172和GlyHl01快速、可逆地抑制。白藜蘆醇刺激FRT細(xì)胞CFTR表達(dá)的半最大效應(yīng)濃度(EC50)約是80μM。白藜蘆醇對CFTR激活作用雖然依賴于細(xì)胞cAMP水平但卻不能提高細(xì)胞內(nèi)cAMP水平。膜片鉗實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步顯示了白藜蘆醇能顯著提高野