核干因子在前列腺癌中的表達及其作用機制的初步研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學博士學位論文核干因子在前列腺癌中的表達及其作用機制的初步研究姓名：劉冉錄申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（泌尿外）指導教師：徐勇;張志宏20070501天津醫(yī)科大學博士研究生學位論文指標的關系。結果前列腺癌標本及P c - 3 、L N C a p 及D U l 4 5 細胞中都表達N S基因，N S 基因在前列腺癌中的表達水平顯著高于前列腺增生中的水平，N S 基因表達水平與前列腺癌的分化程度呈負相關，細胞分化程度越差，N

2、S 基因表達水平越高。結論前列腺癌中高表達N S 基因，N S 基因在前列腺癌的不良分化和惡性增殖中可能起著重要作用。第二部分N u c l e o s t e m i n 基因表達水平下調對P C 一3 細胞增殖能力的影響目的 探討N S 基因與前列腺癌惡性增殖的關系，為前列腺癌的基因治療探索新的靶基因。方法通過s h R N A 質粒表達載體沉默P C 一3 f l t t 胞中N S 基因的表達，研究N S 基因水平下調后P C

3、一3 細胞形態(tài)、周期、增殖能力及凋亡的變化。結果N S基因在P C ．3 細胞中的表達水平下調后，細胞胞膜邊緣突起增多，更趨向于分化；s 期細胞的百分率降低， G 1 期的百分率升高；細胞的體外增殖速率明顯降低，在裸鼠體內致瘤能力、腫瘤的生長速度及腫瘤的最終體積和重量也明顯降低，●細胞凋亡增多。結論N S 基因可能是前列腺癌P C 一3 細胞周期中G 1 ／S 檢查點的一個重要的調節(jié)因子，在P C 一3 細胞惡性增殖中發(fā)揮重要作用，N

4、S 可能是前列腺癌基因治療的理想靶基因之一。第三部分P C ．3 細胞N u c l e o s t e m i n 基因下調后全基因組表達譜的變化分析目的篩選與N S 相互作用的基因及可能的信號通路，探討N S 基因在前列腺癌中的作用機制。方法利用表達譜基因芯片技術分析P C 一3 細胞N S 基因下調后全基因組表達譜的變化，篩選與N S 相互作用的差異基因及信號通路，并利用實時熒光定量P C R 對重要差異基因進行驗證。結果篩選出了

5、2 1 9 個差異表達的基因，這些基因涉及到細胞周期、細胞增殖、信號轉導、細胞凋亡及細胞分化等多個方面，重要差異基因被實時熒光定量P C R 進一步證實。N S 基因下調后主要引起1 N K 4 家族基因( P 1 5 ，P 1 6 ，P 1 8 ) 的上調和c y c l i nD 1 及H D A C l 基因的下調，主要作用點位于C D K 4 ／6 一C y c l i nD 和p R b - E 2 F 1 復合體。結論在基因