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1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文核干因子在前列腺癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制的初步研究姓名:劉冉錄申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):外科學(xué)(泌尿外)指導(dǎo)教師:徐勇;張志宏20070501天津醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果前列腺癌標(biāo)本及P c - 3 、L N C a p 及D U l 4 5 細(xì)胞中都表達(dá)N S基因,N S 基因在前列腺癌中的表達(dá)水平顯著高于前列腺增生中的水平,N S 基因表達(dá)水平與前列腺癌的分化程度呈負(fù)相關(guān),細(xì)胞分化程度越差,N
2、S 基因表達(dá)水平越高。結(jié)論前列腺癌中高表達(dá)N S 基因,N S 基因在前列腺癌的不良分化和惡性增殖中可能起著重要作用。第二部分N u c l e o s t e m i n 基因表達(dá)水平下調(diào)對(duì)P C 一3 細(xì)胞增殖能力的影響目的 探討N S 基因與前列腺癌惡性增殖的關(guān)系,為前列腺癌的基因治療探索新的靶基因。方法通過s h R N A 質(zhì)粒表達(dá)載體沉默P C 一3 f l t t 胞中N S 基因的表達(dá),研究N S 基因水平下調(diào)后P C
3、一3 細(xì)胞形態(tài)、周期、增殖能力及凋亡的變化。結(jié)果N S基因在P C .3 細(xì)胞中的表達(dá)水平下調(diào)后,細(xì)胞胞膜邊緣突起增多,更趨向于分化;s 期細(xì)胞的百分率降低, G 1 期的百分率升高;細(xì)胞的體外增殖速率明顯降低,在裸鼠體內(nèi)致瘤能力、腫瘤的生長速度及腫瘤的最終體積和重量也明顯降低,●細(xì)胞凋亡增多。結(jié)論N S 基因可能是前列腺癌P C 一3 細(xì)胞周期中G 1 /S 檢查點(diǎn)的一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子,在P C 一3 細(xì)胞惡性增殖中發(fā)揮重要作用,N
4、S 可能是前列腺癌基因治療的理想靶基因之一。第三部分P C .3 細(xì)胞N u c l e o s t e m i n 基因下調(diào)后全基因組表達(dá)譜的變化分析目的篩選與N S 相互作用的基因及可能的信號(hào)通路,探討N S 基因在前列腺癌中的作用機(jī)制。方法利用表達(dá)譜基因芯片技術(shù)分析P C 一3 細(xì)胞N S 基因下調(diào)后全基因組表達(dá)譜的變化,篩選與N S 相互作用的差異基因及信號(hào)通路,并利用實(shí)時(shí)熒光定量P C R 對(duì)重要差異基因進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果篩選出了
5、2 1 9 個(gè)差異表達(dá)的基因,這些基因涉及到細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞分化等多個(gè)方面,重要差異基因被實(shí)時(shí)熒光定量P C R 進(jìn)一步證實(shí)。N S 基因下調(diào)后主要引起1 N K 4 家族基因( P 1 5 ,P 1 6 ,P 1 8 ) 的上調(diào)和c y c l i nD 1 及H D A C l 基因的下調(diào),主要作用點(diǎn)位于C D K 4 /6 一C y c l i nD 和p R b - E 2 F 1 復(fù)合體。結(jié)論在基因
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