RECK基因在前列腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移中作用機制的研究.pdf

1、該課題從組織、細胞株、藥物刺激以及動物模型四個方面研究RECK基因與前列腺癌發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移間的關(guān)系及其可能的作用機制.首先,利用RT-PCR 和Real-time PCR技術(shù),檢測發(fā)現(xiàn)前列腺的RECK表達量較正常前列腺組織標本明顯降低(p<0.01),而MMP-2和MMP-9的表達明顯升高(p<0.01),同樣,前列腺癌細胞株(DU-145,LNCap,PC-3)中RECK基因表達量較良性前列腺增生細胞株BPH-1明顯降低(p<0.0

2、1),而MMP-2和MMP-9的表達明顯升高(p<0.01),另一方面,在蛋白水平利用Westem blot技術(shù)檢測提示前列腺癌組織標本中RECK基因的表達量較正常前列腺組織標本明顯降低,且前列腺癌細胞株DU-145、LNCap、PC-3中的RECK基因表達量較良性前列腺增生細胞株BPH-1表達量明顯降低(p<0.01).另一方面,我們應(yīng)用非甾體類抗炎藥NS398刺激前列腺癌細胞株DU-145,應(yīng)用RT-PCR和Real-Time PC

3、R技術(shù)以及Western blot技術(shù)觀察不同藥物濃度刺激后細胞中RECK基因表達水平的變化,研究發(fā)現(xiàn):NS398對RECK基因的表達有明顯的誘導作用,而對MMP-2和MMP-9的表達則有明顯的抑制作用,且其發(fā)揮最大作用的藥物濃度為100μmol/L.最后,我們應(yīng)用前列腺癌細胞株DU-145種植于裸鼠皮下建立前列腺癌動物模型,并應(yīng)用NS398喂養(yǎng)裸鼠,觀察用藥后裸鼠腫瘤組織內(nèi)RECK基因表達水平的變化,同樣利用上述技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),NS39

4、8喂養(yǎng)的動物模型,其RECK基因的表達量明顯升高,而MMP-2和MMP-9的表達量則明顯降低(p<0.01).進一步證實非甾體類抗炎藥抗癌作用的機制可能是通過誘導RECK基因的表達,降低MMP的表達,從而發(fā)揮作用的.目前關(guān)于RECK基因與前列腺癌相互關(guān)系的許多問題尚有待于進一步解決.首先,RECK基因抑制MMP的具體機制有待于進一步闡明,此外,對于不同期別的前列腺癌腫瘤組織中RECK基因的表達量及RECK基因表達量與腫瘤患者預后之間的關(guān)