lncrnarp13650j16.1在前列腺癌中的功能及其作用機(jī)制研究

1、分類號： 密級：U D C： 學(xué)號：406521213457南 昌 大 學(xué) 碩 士 研 究 生學(xué) 位 論 文LncRNA RP13-650J16.1 在前列腺癌中的功能 在前列腺癌中的功能及其作用機(jī)制研究 及其作用機(jī)制研究The function and mechanism of Long non-coding RNARP13-650J16.1 in Prostate Carcinoma: An Preliminary Study王浩林

2、 王浩林培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：王共先 教授申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：外科學(xué)（泌尿外）論文答辯日期：2016 年 5 月答辯委員會主席：評閱人：2015 年 6 月摘要II摘 要目的： 目的：1.高通量基因芯片篩選出前列腺癌組織與癌旁正常組織相關(guān)的差異表達(dá)lncRNAs 并篩選出關(guān)鍵 LncRNA；2.對其中的關(guān)鍵 lncRNA 的表達(dá)進(jìn)行驗證探討其在前列腺癌組織中的表達(dá)水平與癌旁正常組織

3、中的相關(guān)性；3.進(jìn)一步探討關(guān)鍵分子在前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制。方法： 方法：1.通過差異倍數(shù)、鄰近編碼基因信息分析、長度特征分析等策略初步篩選前期實驗得出的并與前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的關(guān)鍵分子。2.收集 15 例臨床病理診斷為前列腺癌的患者按 Trizol 法提取 RNA， qRT-PCR檢測前列腺癌中 RP13-650J16.1 的表達(dá)情況。3.選取前列腺癌細(xì)胞株 22RV1、DU145 進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。4.構(gòu)建 siRNA 干擾質(zhì)

4、粒載體：siRNA-584705,三種細(xì)胞均分為轉(zhuǎn)染組，空轉(zhuǎn)染組以 LipofectamineTM 2000 為載體將 siRNA 轉(zhuǎn)染細(xì)胞，進(jìn)一步采用 qRT-PCR驗證轉(zhuǎn)染效果以確定是否轉(zhuǎn)染成功。5.對于轉(zhuǎn)染后抑制 RP13-650J16.1 表達(dá)的細(xì)胞株通過 MTT，transwell，平板克隆實驗來檢測 22RV1 及 DU145 的增殖、遷移、侵襲能力，并以轉(zhuǎn)染 si-NC 的陰性對照組以及空白對照作為對比。6.生物信息學(xué)預(yù)測

5、 RP13-650J16.1 的靶基因，利用 RT-PCR 實驗檢測下調(diào)RP13-650J16.1 對靶基因的影響7.轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞采用 western blot 檢測下游相關(guān)靶基因調(diào)控蛋白 RAC3,BCL-2 的表達(dá)變化。并以轉(zhuǎn)染 si-NC 的陰性對照組作為對比。結(jié)果： 結(jié)果：1.芯片分析結(jié)果顯示共有 13 條與癌癥通路相關(guān)的 lncRNA 在前列腺癌中有差異性表達(dá)， 包括 lncRNA RP13-650J16.19， 大樣本組織