高濃度依托咪酯對(duì)HL-60細(xì)胞線粒體膜電位的改變.pdf

1、目的：以急性髓性細(xì)胞白血病細(xì)胞HL-60細(xì)胞凋亡作為研究終點(diǎn)，利用熒光探針JC-1觀察HL-60細(xì)胞凋亡線粒體膜電位的變化，同時(shí)用熒光探針Calcein AM熒光染色檢測(cè)線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開(kāi)放的程度。 方法：正常培養(yǎng)HL-60細(xì)胞，濃度調(diào)節(jié)至1.5 × 105/ml，按照不同的處理方法進(jìn)行分組：1．對(duì)照組：僅在無(wú)依托咪酯的正常培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h：2.損傷組：用含500μM依托咪酯的培養(yǎng)基刺激24h。收集細(xì)胞后，流式細(xì)胞儀利用熒光探

2、針JC-1檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位的改變，熒光探針Calcein AM熒光染色檢測(cè)線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開(kāi)放的程度。 結(jié)果：JC-1檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位改變的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，損傷組綠色熒光細(xì)胞數(shù)目占全部細(xì)胞的比例為41.72％，明顯高于對(duì)照組3.53％；線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開(kāi)放(MPTP)試驗(yàn)中，損傷組平均熒光強(qiáng)度為3.54，明顯低于對(duì)照組熒光強(qiáng)度33.71。 結(jié)論：高濃度依托咪酯誘發(fā)HL-60細(xì)胞凋亡的途徑之一為通過(guò)激活線粒體通透轉(zhuǎn)換