Ghrelin在反流性食管炎患者胃粘膜表達(dá)及其血漿中濃度的變化.pdf

1、目的：流行病學(xué)調(diào)查顯示，在發(fā)達(dá)國(guó)家隨著幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染率下降，胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)發(fā)生率增加。研究發(fā)現(xiàn)根除H.pylori后，血漿Ghrelin顯著上升。由于Ghrelin可促進(jìn)食欲、增加體重，推測(cè)此可能是H.pylori感染率呈下降趨勢(shì)的西方國(guó)家肥胖人口增加的原因之一，近幾年研究表明肥胖能誘發(fā)GERD的發(fā)病。但

2、人體實(shí)驗(yàn)表明，肥胖者Ghrelin較正常體重者低。GERD是常見的上消化道動(dòng)力障礙性疾病，反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)是其中最重要的一種類型。食管下端括約肌的一過性松弛(transient lower esophagealsphincter relaxations,TLESR)是引起反流的最重要的發(fā)病因素已取得共識(shí)。而胃排空延緩使胃內(nèi)壓力升高，易誘發(fā)TLESR，導(dǎo)致反流。Ghrelin是一種28個(gè)氨基酸多肽

3、，是生長(zhǎng)激素促分泌劑受體的內(nèi)源性配體，它能影響食欲，調(diào)節(jié)能量代謝。Ghrelin主要由位于胃的泌酸腺區(qū)的Gr細(xì)胞分泌。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)Ghrelin有明顯促胃腸動(dòng)力活性。它能加快胃排空，增強(qiáng)小腸轉(zhuǎn)運(yùn)及恢復(fù)術(shù)后腸梗阻。另外研究發(fā)現(xiàn)Ghrelin通過作用于迷走神經(jīng)能誘導(dǎo)消化間期移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)(migrating motor complexes，MMC)。Ghrelin尚可作用于近端胃從而提高下食管括約肌(lower esophageal sph

4、incter,EES)壓力起到抗反流作用。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于Ghrelin與RE關(guān)系的研究較少，本課題通過檢測(cè)Ghrelin在RE患者胃粘膜中表達(dá)及其在血漿中濃度，旨在探明Ghrelin在RE患者中的變化，從而闡明其在本病發(fā)生過程中可能發(fā)揮的作用。通過本臨床實(shí)驗(yàn)的研究，進(jìn)一步為研究GERD的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：研究對(duì)象包括RE患者32例作為病例組，其中男性20例、女性12例，平均年齡45.2歲，平均體質(zhì)指數(shù)25.2kg/m2

5、；另選擇無GERD臨床癥狀，胃鏡下無RE表現(xiàn)者15例作為對(duì)照組，其中男性9例，女性6例，平均年齡44.9歲，平均體質(zhì)指數(shù)25.1kg/m2。病例組在性別構(gòu)成、平均年齡、平均體質(zhì)指數(shù)與對(duì)照組間無顯著差異。所有研究對(duì)象均無高血壓、心臟病、糖尿病、肝硬化、腎功能不全、腦血管病、惡性腫瘤、消化性潰瘍、幽門梗阻，并且近期無口服非甾體抗炎藥、糖皮質(zhì)激素及飲酒史，同時(shí)用快速尿素酶試驗(yàn)和血清抗體檢測(cè)H.pylori均為陰性。入選病例行電子胃鏡檢查觀察食

6、管粘膜情況，按照洛杉磯(Los Angeles,LA)分類標(biāo)準(zhǔn)將RE患者進(jìn)行內(nèi)鏡下分級(jí)，并取胃竇粘膜1塊，用于快速尿素酶試驗(yàn)檢測(cè)H.pylori；若結(jié)果陰性，再取胃底粘膜2塊，以10％中性甲醛固定，石蠟包埋、切片。當(dāng)日空腹留取血樣本2份，1份立即送檢分離血清檢測(cè)H.pylori抗體(若結(jié)果陰性方可作為最終入選對(duì)象)；另1份用于測(cè)定血漿Ghrelin濃度。最后將胃黏膜標(biāo)本石蠟切片，采用PV二步法行免疫組織化學(xué)染色，光鏡下觀察Ghrelin

7、表達(dá)情況，并通過圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。取采集的血漿標(biāo)本用放射免疫分析法(radioimmunoassay,RIA)測(cè)定血漿Ghrelin濃度。收集檢測(cè)數(shù)據(jù)，采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用方差分析。 結(jié)果：病例組32例中內(nèi)鏡下LA分類A級(jí)10例，B級(jí)15例，C級(jí)7例，無D級(jí)病例。免疫組織化學(xué)染色顯示在病例組及對(duì)照組胃粘膜中Ghrelin陽性細(xì)胞表達(dá)主要位于泌酸腺腺體的頸部和

8、底部。病例組患者胃粘膜Ghrelin表達(dá)顯著性低于對(duì)照組(393.52±49.29 vs 430.93±47.53,P<0.05)；病例組胃粘膜Ghrelin陽性表達(dá)隨著LA分級(jí)而遞減，A級(jí)(412.86±48.42)、B級(jí)(388.89±45.56)、C級(jí)(375.81±56.11)，其中B、C級(jí)與對(duì)照組相比，差異顯著(P<0.05)。血漿Ghrelin的濃度亦明顯低于對(duì)照組(1.48±0.98 ng/ml vs 2.16±1.23n

9、g/ml,P<0.05)，且隨著LA分級(jí)而遞減，A級(jí)(1.91±0.95ng/ml)、B級(jí)(1.39±1.09ng/ml)、C級(jí)(1.07±0.74ng/ml)，其中B、C級(jí)與對(duì)照組相比，差異顯著(P<0.05)。 結(jié)論：在RE患者中胃粘膜Ghrelin的表達(dá)明顯低于對(duì)照組，血漿Ghrelin濃度也呈相應(yīng)的變化，證實(shí)循環(huán)中Ghrelin主要來源于胃黏膜合成。Ghrelin有明顯促胃動(dòng)力活性，加快胃排空。因此推測(cè)隨Ghrelin水