油酰乙醇胺對脂肪肝細(xì)胞模型的作用及機(jī)制.pdf

1、　　目 的：在脂肪肝細(xì)胞模型建立的基礎(chǔ)上,首次探討油酰乙醇胺(oleoylethanolamide OEA)對非酒精性脂肪肝(NAFLD)體外細(xì)胞模型的作用及可能機(jī)制。
　　方法：以HepG2細(xì)胞為研究對象,給予不同濃度的醫(yī)用靜脈滴注脂肪乳劑(MFE)和10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HepG2細(xì)胞24小時,通過MTT法測定細(xì)胞活性,結(jié)合油紅0染色及細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的測定,確定NAFLD體外模型的建立。模型確立后給予OEA及

2、陽性對照藥非諾貝特6、12、24小時。藥物干預(yù)結(jié)束,提取細(xì)胞總RNA,并反轉(zhuǎn)錄,通過實時定量PCR檢測脂代謂}及脂肪肝相關(guān)炎癥基因的表達(dá),同時檢測細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(TG)含量,及油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴蓄積情況。
　　結(jié) 果： (1)通過油紅O染色、TG的測定及結(jié)合MTT結(jié)果顯示：稀釋20倍MFE對細(xì)胞活性無顯著影響,且細(xì)胞內(nèi)TG顯著升高,細(xì)胞內(nèi)脂滴蓄積明顯,是誘導(dǎo)細(xì)胞脂肪變性的最佳濃度。(2)TG含量測定：OEA 12小時處理組

3、與模型組細(xì)胞內(nèi)TG含量顯著下降(P

4、較模型組表達(dá)顯著降低(P　　結(jié)論：I%MFE培養(yǎng)HepG2細(xì)胞24小時,可誘導(dǎo)細(xì)胞脂肪變,可作為脂肪肝細(xì)胞模型：OEA通過激活脂代謝基因PPAR.cc、Sirt.1、CPT-1的mRNA表達(dá),下調(diào)SREBP.1c及炎癥基因TNF.a的表達(dá),從而緩解HepG2細(xì)胞脂肪變,減少細(xì)胞內(nèi)脂滴,因此OEA對脂肪肝細(xì)胞