重組人血管內(nèi)皮抑素治療鼠源性血管瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究重組人血管內(nèi)皮抑素對(duì)鼠源性血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞株(EOMA)的抑制作用及其機(jī)制，并與血管瘤常用藥物曲安縮松、平陽(yáng)霉素、干擾素α-2a相比較，觀察單用及聯(lián)合用藥對(duì)EOMA細(xì)胞的抑制作用；建立Kasabach-Merritt綜合征裸鼠移植模型。觀察腫瘤生長(zhǎng)情況，了解其生物學(xué)特點(diǎn)；觀察重組人血管內(nèi)皮抑素瘤內(nèi)注射對(duì)鼠Kasabach-Merritt綜合征的治療效果，并于臨床上常用藥物平陽(yáng)霉素、曲安縮松相比較。 方法：①M(fèi)TT法檢測(cè)不

2、同濃度的YH-16、PYM、曲安縮松及INFα-2a單用對(duì)EOMA細(xì)胞作用24h、48h、72h的抑制率，篩選出四種藥的最適抑制濃度。②MTT法比較YH-16、PYM、曲安縮松、INFα-2a四種藥物單用對(duì)EOMA細(xì)胞增殖抑制作用的強(qiáng)弱。③MTT法檢測(cè)YH-16、PYM、曲安縮松三藥兩兩聯(lián)合應(yīng)用對(duì)EOMA細(xì)胞的抑制作用(金氏公式法判斷聯(lián)合用藥的效果)。④采取流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定YH-16作用EOMA細(xì)胞48h后，細(xì)胞凋亡率及Caspase-3

3、表達(dá)的變化。 結(jié)果：①YH-16各濃度組在24h、48h及72h三個(gè)作用時(shí)間點(diǎn)對(duì)EOMA細(xì)胞抑制作用顯著(P＜0.01)，并存在明顯的劑量依賴關(guān)系。②YH-16 200μg/mL組在各時(shí)間點(diǎn)，其抑制率(Inhibitory rate，IR)均高于50μg/mL、100μg/mL組(P＜0.05)，而與400μg/mL及800μg/mL組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，故篩選出200μg/mL為最適抑制濃度；同樣方法篩選出P

4、YM、曲安縮松、INFα-2a的最適抑制濃度分別為150μg/ml、250μg/mL、5×105u/mL。③四種藥物抑制作用由強(qiáng)到弱：PYM＞YH-16＞曲安縮松＞INFα-2a。④各濃度的YH-16與曲安縮松或與PYM聯(lián)合作用EOMA細(xì)胞時(shí)，其聯(lián)合效應(yīng)均為拮抗效應(yīng)，Q值均＜0.85；各濃度的PYM與曲安縮松聯(lián)合作用EOMA細(xì)胞，其聯(lián)合效應(yīng)為相加效應(yīng)，0.85＜Q值＜1.15。⑤YH-16作用后細(xì)胞凋亡率隨藥物濃度增加而增高，Caspa

5、se-3表達(dá)在YH-16各濃度組均增強(qiáng)(P＜0.01)。 結(jié)論：YH-16對(duì)EOMA細(xì)胞有確切的抑制作用。該作用弱于PYM，而強(qiáng)于曲安縮松及INFα-2a；這種抑制作用主要是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)，且Caspase-3參與此過(guò)程；YH-16能拮抗曲安縮松及PYM抑制EOMA細(xì)胞增殖的作用；曲安縮松能增加PYM對(duì)EOMA的抑制增殖作用；YH-16、PYM瘤內(nèi)注射能明顯抑制Kasabach-Merritt綜合征的發(fā)展，改善臨床癥狀，且