FAT逆轉K562-A02細胞多藥耐藥及其機理的研究.pdf

1、多藥耐藥(Multidrug resistance，MDR)是腫瘤細胞接觸一種抗腫瘤藥物后不僅對該藥產生耐藥性，而且對其它結構和作用機制不同的多種抗腫瘤藥物也產生交叉耐藥性，從而大大降低了抗腫瘤藥物的療效。當今MDR是腫瘤化療失敗的主要原因之一，抗藥性機制及抗藥性克服途徑的探討已成為腫瘤研究的重大課題。對于腫瘤MDR的研究，目前已知有多種機制參與，包括藥物運輸/攝取如P糖蛋白(Permeability-glycrotein，Pgp，P-

2、170)；代謝解毒谷胱甘肽(Glutathion，GSH)及其酶系統(tǒng)；藥物作用效靶如DNA拓撲異構酶II(Topo II)；DNA損傷修復；凋亡途徑(如bcl-2、P53基因)改變等。其中認識最早并且研究最深入的是Pgp/mdrl介導的MDR，也稱經典MDR。 目前許多MDR逆轉方法被發(fā)現。鈣離子通道阻滯劑維拉帕米(Verapamil，VRP，異博定)、環(huán)孢霉素A(CSA)及多種多樣的親脂性陽離子化合物雖有部分或完全的MDR逆轉

3、作用，但同時伴隨有心臟毒性、免疫抑制、腎毒性等嚴重毒副作用，而使其臨床應用受到限制。尋找高效而毒副作用小又能克服MDR的逆轉劑有著十分重要的意義。理想的MDR逆轉劑應具備下列特征：對正常的組織細胞無毒性；體內能獲得的藥物濃度在體外有逆轉MDR的活性；穩(wěn)定且半衰期長；代謝物仍有活性。 K562/A02細胞是有典型MDR表型的人白血病細胞株，由慢性粒細胞白血病(CML)紅系急變敏感細胞系K562/S衍生而成，具有Pgp高表達，mdr

4、l mRNA高表達，Topo IImRNA低表達，GST活性高等生物學特性。本課題應用細胞生物學法、生物化學法進行FAT逆轉K562/A02細胞多藥耐藥機理的研究，為臨床應用提供理論與實驗依據。 方法： 1.MTT法測定FAT對K562細胞和K562/A02細胞增殖的影響。 2.流式細胞術測定FAT對K562細胞和K562/A02細胞內Rho-123積聚濃度的影響。 3.流式細胞術測定FAT對K562/A

5、02細胞Pgp表達水平的影響。 4.DTNB法測定FAT對K562/A02細胞內谷胱甘肽含量的影響。 結論： 1.FAT低濃度時對K562／A02細胞和K562細胞均無直接細胞毒作用，但是能明顯降低阿霉素對K562／A02細胞的IC50值，逆轉效果與劑量相關；而對于K562細胞無明顯影響。 2.FAT可增加K562／A02細胞內羅丹明123含量，且與劑量相關，而對于K562細胞無明顯影響。 3.K