三疣梭子蟹卵黃蛋白原的基因克隆及分子特征分析.pdf

1、卵黃蛋白原是一種特異性存在于無(wú)脊椎及低等脊椎卵生動(dòng)物雌性個(gè)體中的蛋白質(zhì)，是卵黃蛋白的前體。卵黃蛋白是無(wú)脊椎及低等脊椎卵生動(dòng)物成熟的卵母細(xì)胞的主要成分，也是其胚胎發(fā)育過(guò)程中的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。目前，已有關(guān)于卵黃蛋白原在許多物種中的研究報(bào)道。在甲殼類(lèi)中，迄今為止卵黃蛋白原的研究主要集中在蝦類(lèi)。而在另外一種具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的甲殼類(lèi)動(dòng)物蟹中，有關(guān)其卵黃蛋白原的研究尤其是其分子生物學(xué)方面的研究還較少見(jiàn)。本研究通過(guò)RT-PCR，RACE等技術(shù)克隆得到了

2、三疣梭子蟹卵黃蛋白原的一個(gè)基因，該cDNA序列全長(zhǎng)7846bp，含有一個(gè)7680bp的開(kāi)放閱讀框，編碼一個(gè)含有2560個(gè)氨基酸殘基的蛋白質(zhì)。其5’和3’的非翻譯區(qū)分別為27bp和139bp。將其開(kāi)放閱讀框翻譯為氨基酸序列后進(jìn)行BLAST，該序列顯示了與其他已知的甲殼類(lèi)卵黃蛋白原序列32％-75％的相似性。通過(guò)SDS-PAGE和Westernblotting分析，在三疣梭子蟹的卵巢中，卵黃蛋白主要包含有三個(gè)亞基(102kD，100kD和8