以Ⅳ型膠原酶為靶點(diǎn)的單抗導(dǎo)向藥物的抗腫瘤作用以及建立Ⅳ型膠原酶抑制劑篩選模型的研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文以Ⅳ型膠原酶為靶點(diǎn)的單抗導(dǎo)向藥物的抗腫瘤作用以及建立Ⅳ型膠原酶抑制劑篩選模型的研究姓名：王風(fēng)強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：甄永蘇2002.6.1中田協(xié)和醫(yī)科大學(xué)餌士論文中文摘要天和第8天靜脈給藥兩次，觀察偶聯(lián)物對(duì)小鼠移植性肝癌H22的抑制作用。結(jié)果，3D6LDM偶聯(lián)物005mg／kg和010mg／kg劑量與游離LDM005mg／kg劑量組相比腫瘤生長(zhǎng)抑制作用顯著增強(qiáng)。按瘤體

2、積計(jì)算，實(shí)驗(yàn)第14天，上述兩個(gè)劑量的偶聯(lián)物腫瘤抑制率分別為866％和959％，顯著(PO05VSLDM)，878％和979％(Po01VSLDM)。進(jìn)～步提高LDM、3D6與LDM的混合物及3D6LDM偶聯(lián)物的給藥劑量，單次給藥，觀察動(dòng)物的耐受情況，結(jié)果動(dòng)物對(duì)偶聯(lián)物的耐受劑量較對(duì)游離力達(dá)霉素和混合物的耐受劑量顯著提高，顯示偶聯(lián)物可能通過(guò)在動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤特異性定位提高了腫瘤部位的藥物濃度，從而與游離藥物相比療效顯著增強(qiáng)并且全身毒性降低，混

3、合物因不具備這一機(jī)制而不能提高動(dòng)物對(duì)其的耐受劑量。由此得出結(jié)論，單抗3D6LDM偶聯(lián)物除了具有3D6和LDM各自的效應(yīng)功能外，還可通過(guò)抗體的靶向作用表現(xiàn)出比同等劑量游離LDM更強(qiáng)的抗腫瘤作用和較低的毒性。卜／二、抗Ⅳ型膠原酶單抗3D6Fab’片段與力達(dá)霉素偶聯(lián)物的制各及其抗腫瘤作用(，j、型化的單抗藥物偶聯(lián)物因?qū)?shí)體瘤具有更高的穿透力和在人體內(nèi)較低的免疫原性而成為單抗導(dǎo)向藥物發(fā)展的趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)室的研究表明，以小型化的單抗3D6Fab’片

4、段與平陽(yáng)霉紊構(gòu)建的偶聯(lián)物在小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型中表現(xiàn)出比游離平陽(yáng)霉素更強(qiáng)的抗腫瘤作用以針對(duì)肝癌表面抗原的單抗3A5的lab’片段與LDM構(gòu)建的偶聯(lián)物在對(duì)小鼠移植性結(jié)腸癌C26的治療中顯示出很好的療效，并在小鼠移植性肝癌H22模型中顯示出初步的療效。本項(xiàng)研究以異型雙功能偶聯(lián)劑MBS作為交聯(lián)劑制備了單抗3D6的lab7片段與LDM的l：1偶聯(lián)物，分子量在65kDa左右。偶聯(lián)物保留了3D6lab7片段對(duì)Iv型膠原酶和H22細(xì)胞的特異性結(jié)合能力，并

5、在體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)H22腫瘤細(xì)胞顯示出更強(qiáng)的殺傷作用。以靜脈注射三次(實(shí)驗(yàn)第1，4，7天)的方式給藥，與游離LDM005mg／kg組相比，lab’一LDM偶聯(lián)物005mg／kg和010mg／kg劑量組的腫瘤生長(zhǎng)顯著延遲，實(shí)驗(yàn)第1l天的抑瘤率分別為863％和992％(P0，05和，(001VSLDM)，而LDM005mg／kg劑量組僅為812％。但以FabLDM以010mg／kg劑量給藥三次，動(dòng)物的存活時(shí)間短于對(duì)照組，LDM005rag，kg