一株拮抗馬鈴薯晚疫病菌菌株的分離鑒定及抑菌性初步分析.pdf

1、由致病疫霉Phytophthora infestans(Mont.) de Bary引起的馬鈴薯晚疫病是生產(chǎn)上最重要的農(nóng)業(yè)病害之一，每年造成我國約65-130億元的經(jīng)濟(jì)損失。通過篩選和鑒定對致病疫霉有拮抗作用的菌種資源來防治馬鈴薯晚疫病，這在生產(chǎn)上具有廣闊的應(yīng)用潛力。
　　地絲菌屬真菌Geomyces sp.WZJ是本實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)馬鈴薯晚疫病菌時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)并分離得到的。通過對峙實(shí)驗(yàn)檢測其對馬鈴薯晚疫病菌不同菌株的抑制效率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該

2、菌株對本實(shí)驗(yàn)室保存的13個(gè)馬鈴薯晚疫病菌菌株具有相似的抑制作用，抑制效率在64.4％-78.5％之間。檢測其抑菌譜發(fā)現(xiàn)，該菌株對辣椒疫霉（P.capsici）、大豆疫霉(P.sojae)和煙草黑脛病菌(P.nicotianae)等卵菌病原也具有良好的拮抗效果，抑制率分別達(dá)到68.4％、58.5％、58.7％，而對其它真菌病害抑制效率較差，說明該菌株對疫霉屬病原菌具有一定的特異性拮抗作用。
　　通過形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對其進(jìn)行鑒定

3、，將該菌株鑒定為地絲菌屬真菌并命名為Geomyces sp.WZJ。生物學(xué)特性研究表明，該菌株在RA、PDA、PSA培養(yǎng)基上均能正常生長，在查氏培養(yǎng)基(Czapek)不能正常生長，菌落直徑最小。在PSA培養(yǎng)基產(chǎn)生孢子較多，菌絲生長最快，最適合其生長;該菌株在4-25℃均能生長，最適溫度為18℃，適于低溫生長;對pH要求不嚴(yán)格，在pH5-12范圍內(nèi)均能生長，最適pH為6。
　　對該菌株進(jìn)行液體發(fā)酵，得到發(fā)酵上清液，檢測發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵上清

4、液具有良好的抑菌效果，而菌絲體提取物基本無抑菌活性，說明抑菌物質(zhì)被分泌到胞外起作用。通過生長速率法檢測發(fā)酵上清液的抑菌效率，結(jié)果顯示，發(fā)酵5d的發(fā)酵上清液與黑麥培養(yǎng)基體積比為1∶25時(shí)，抑菌效率為35.6％;發(fā)酵10d的發(fā)酵上清液與黑麥培養(yǎng)基體積比為1∶25時(shí)，抑菌效率為93.6％，說明在一定培養(yǎng)時(shí)間范圍內(nèi)，隨著發(fā)酵天數(shù)的增高，抑菌物質(zhì)逐漸增多。測定發(fā)酵16d的發(fā)酵上清液的“IC50”，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，將發(fā)酵上清液稀釋176倍時(shí)，該上清液對馬