大鼠骨關節(jié)損傷炎性疼痛分子機制的探討.pdf

1、研究目的：體育運動大多具有對抗性，尤其現今高校體育運動項目逐漸增加，大學生越來越多地參加到體育運動中來，運動損傷在高校體育活動中發(fā)生率也相對頻繁。體育專業(yè)的學生因為專業(yè)特點，決定了他們需要經常進行體育運動，發(fā)生運動損傷也十分普遍。這不僅影響學生正常的學習和生活，而且危及其身體健康。關節(jié)則是運動損傷中最常見的部位。由于關節(jié)損傷處理不及時，很容易造成關節(jié)的慢性損傷，一直發(fā)展成為關節(jié)炎。關節(jié)炎產生的慢性疼痛是困擾運動員的首要癥狀。在現階段的研

2、究中，觀察佐劑性關節(jié)炎大鼠血清基質金屬蛋白酶3（Matrix Metalloproteinase—3，MMP—3）濃度變化，通過RT—PCR檢測大鼠腰段脊髓炎性相關因子腫瘤壞死因子（TNF—α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL—6）以及神經遞質γ—氨基丁酸（gamma—aminobutyric acid，GABA）的表達水平。以布洛芬為陽性對照，探討運動性關節(jié)損傷炎性疼痛發(fā)生發(fā)展可能的分子機制，為運動性骨關節(jié)損傷治療及新的臨床

3、用藥提供理論與實驗依據。 研究方法：5—6周齡健康雄性SD大鼠64只，隨機分為實驗對照組（n=16）、非用藥組（n=16）、HWTX—Ⅰ用藥組（n=16）、布洛芬用藥組（n=16），采用踝關節(jié)腔內注射完全弗氏佐劑制作大鼠佐劑性關節(jié)損傷模型。采用本課題組建立的大鼠硬脊膜外腔置管手術方法，利用相關的抗炎制劑進行脊髓硬膜外腔和灌胃給藥干預，應用酶聯免疫吸附反應（ELISA）檢測血清中MMP—3的濃度變化，采用逆轉錄—多聚酶鏈式反應（R

4、T—PCR）實驗技術，檢測腰段脊髓中TNF—α、IL-1β、IL—6、GABA的表達水平。 研究結果： （1）通過對實驗大鼠進行行為學評分，證明HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥能明顯減輕炎性骨關節(jié)損傷大鼠損傷側關節(jié)的傷害性行為反應，其效果相對于臨床上常用的鈣通道拮抗劑布洛芬更為明顯。 （2）通過ELISA技術，檢測到血清中MMP—3在非用藥組的濃度明顯高于HWTX—Ⅰ用藥組（P<0.05）和布洛芬用藥組（P<0.05）

5、，有統計學意義。 （3）通過RT—PCR技術觀察到，脊髓中TNF—α、IL-1β、IL—6 mRNA的表達水平以非用藥組最高，布洛芬用藥組次之，HWTX—Ⅰ用藥組最低，布洛芬用藥組、HWTX—Ⅰ用藥組與非用藥組之間存在非常顯著性差異（P<0.01）。 （4）通過RT—PCR技術觀察到，與非用藥組和布洛芬用藥組相比，HWTX—Ⅰ組踝關節(jié)組織GABA表達明顯減少，差異顯著，具有統計學意義（p<0.05）。 結論：

6、 （1）通過對實驗大鼠進行行為學疼痛評分，證明HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥以及胃腸道灌入布洛芬能明顯減輕炎性骨關節(jié)損傷大鼠損傷側關節(jié)的疼痛性行為反應。 （2）通過對實驗大鼠進行損傷側關節(jié)關節(jié)周長測量，證明HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥以及胃腸道灌入布洛芬，能明顯減輕炎性骨關節(jié)損傷大鼠關節(jié)腫脹程度。 （3）硬脊膜外腔注射HWTX—Ⅰ以及通過胃腸道灌入布洛芬，都可下調炎性骨關節(jié)損傷大鼠血清中MMP—3的濃度，其可能分子機制在于