ATP在大鼠逼尿肌不穩(wěn)定中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和目的：逼尿肌不穩(wěn)定(detrusorinstability，DI)是泌尿外科最常見(jiàn)的一種膀胱功能障礙，引起的病因很多，其發(fā)生機(jī)制不完全清楚，近年來(lái)的研究主要集中在逼尿肌的神經(jīng)調(diào)控和逼尿肌自身結(jié)構(gòu)與功能的改變上，取得了很大進(jìn)展，提出了DI發(fā)生機(jī)制的神經(jīng)源性學(xué)說(shuō)和肌源性學(xué)說(shuō)，但都不能滿(mǎn)意解釋DI的發(fā)生。DI發(fā)生機(jī)制中膽堿能神經(jīng)超敏學(xué)說(shuō)最受重視，但臨床上抗膽堿能治療效果并不滿(mǎn)意，說(shuō)明在膀胱逼尿肌收縮中存在非膽堿能收縮成分，其中以AT

2、P為神經(jīng)遞質(zhì)的嘌呤能神經(jīng)調(diào)節(jié)受到關(guān)注。逼尿肌功能的異常主要表現(xiàn)在收縮力和興奮性的改變，因此研究ATP對(duì)DI膀胱逼尿肌收縮力和興奮性的改變有助于解釋ATP在DI發(fā)生中的作用，但以往研究較少，且結(jié)論不一；在膀胱，神經(jīng)遞質(zhì)ATP主要由膀胱上皮細(xì)胞和支配逼尿肌的神經(jīng)釋放，它們各自在DI發(fā)生中的作用如何也不完全清楚。本研究目的：以正常和BOO后DI大鼠膀胱和膀胱逼尿肌條為研究對(duì)象，觀察ATP和ATP拮抗劑(PPADS)對(duì)在體和離體膀胱的作用差別，

3、PPADS對(duì)電刺激誘發(fā)的逼尿肌條收縮力的影響，ATP對(duì)機(jī)械牽張誘發(fā)的逼尿肌條自發(fā)性收縮頻率和幅度的影響，探討ATP在DI發(fā)生中的作用。 材料和方法：①采用雌性4-5月齡SD大鼠，經(jīng)陰道前壁切開(kāi)，近膀胱頸部部分結(jié)扎尿道制作膀胱出口梗阻(bladderoutletobstruction，BOO)模型，同期正常大鼠作對(duì)照，6w后膀胱造瘺，3d后清醒充盈性膀胱測(cè)壓將大鼠分為BOODⅠ組、BOO逼尿肌穩(wěn)定(detrusorstabilit

4、y，DS)組和正常DS組。②制作BOODI、BOODS和正常DS組大鼠離體逼尿肌條，37℃Kreb's液孵育，在0.5g力牽引下固定逼尿肌條，分別行加PPADS前、后的電刺激逼尿肌條收縮實(shí)驗(yàn)，不同濃度ATP作用下的離體逼尿肌條自發(fā)收縮實(shí)驗(yàn)，觀察加PPADS前、后電刺激逼尿肌條的收縮力，ATP作用前、后逼尿肌條自發(fā)性收縮頻率、收縮幅度以及ATP作用下逼尿肌先收縮后舒張的雙相效應(yīng)改變。③行BOODI和正常DS組大鼠在體膀胱內(nèi)給予NaCl、A

5、TP、PPADS后充盈性膀胱測(cè)壓實(shí)驗(yàn)，比較兩組大鼠最大膀胱功能容量、排尿間隔時(shí)間、最大膀胱排尿壓和逼尿肌不穩(wěn)定收縮頻率的變化；在體膀胱實(shí)驗(yàn)3d后全切BOODI和正常DS組大鼠膀胱并孵育，分別行膀胱內(nèi)和浴液中給予ATP、PPADS后灌注膀胱測(cè)壓實(shí)驗(yàn)，比較兩組大鼠膀胱壓力曲線(xiàn)和在20、50s、4、8min時(shí)相點(diǎn)的膀胱壓力值。 結(jié)果：①成功建立了BOODI模型大鼠，DI總的發(fā)生率為70.59％(18+18/25+26)。②電刺激誘發(fā)的

6、三組大鼠離體逼尿肌條收縮力，給予PPADS后均顯著降低，降低值及其在收縮力中的比例BOODI＞BOODS＞正常DS組大鼠，組間比較P＜0.05。③離體逼尿肌條自發(fā)性收縮頻率BOODⅠ組大鼠明顯高于BOODS和正常DS組大鼠，后兩組間無(wú)差別；逼尿肌條自發(fā)性收縮幅度BOODI和BOODS組大鼠無(wú)明顯差別，而兩組顯著高于正常DS組大鼠。④ATP作用于大鼠離體逼尿肌條的收縮、舒張雙相效應(yīng)，隨濃度的增加而增強(qiáng)，均以BOODI大鼠更顯著(P＜0.0

7、5)。ATP對(duì)離體逼尿肌條自發(fā)性收縮頻率無(wú)明顯改變，但隨ATP的舒張效應(yīng)降低逼尿肌條自發(fā)性收縮幅度，在100μmol/LATP時(shí)，自發(fā)收縮幅度降低值BOODI、BOODS和正常DS大鼠問(wèn)無(wú)差別，在1mmol/LATP時(shí)三組大鼠逼尿肌條自發(fā)收縮幅度逐漸完全消失，自發(fā)收縮頻率不能統(tǒng)計(jì)。⑤大鼠在體膀胱內(nèi)給予PPADS后，BOODI和正常DS組大鼠膀胱功能容量、排尿間隔時(shí)間增加，給予ATP后效應(yīng)完全相反；給予PPADS，DI膀胱逼尿肌不穩(wěn)定收縮

8、頻率明顯降低，給予ATP，70％正常DS大鼠引發(fā)DI發(fā)生，且高濃度ATP更明顯；而最大膀胱排尿壓無(wú)顯著性改變。⑥BOODI和正常DS組大鼠離體膀胱內(nèi)給予ATP、PPADS、NaCl后灌注膀胱測(cè)壓未見(jiàn)明顯膀胱壓力曲線(xiàn)不同，與在體膀胱實(shí)驗(yàn)效應(yīng)差別明顯。在離體膀胱孵育液中加入ATP引起膀胱收縮，而先予PPADS孵育離體膀胱后ATP對(duì)膀胱的收縮作用明顯減弱。 結(jié)論：①DI膀胱逼尿肌自發(fā)性興奮增強(qiáng)，可能是DI發(fā)生的原因之一。②ATP對(duì)逼尿