臍血來源樹突狀細胞的體外擴增及誘導特異性抗卵巢癌免疫.pdf

1、山東大學碩士學位論文臍血來源樹突狀細胞的體外擴增及誘導特異性抗卵巢癌免疫姓名：孫麗申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：孔北華2001.5.23山東大學2 0 0 1 碩士學位論文臍血來源樹突狀細胞的體外擴增及誘導特異性抗卵巢癌免疫研究生導 師孫麗孔北華中文摘要目的研究臍血來源樹突狀細胞( D C ) 的體外培養(yǎng)擴增及誘導特異性抗卵巢癌細胞的免疫效應／方法1 、從臍血中無菌分離單個核細胞( M N C s ) 后去除懸浮細胞j 獲得

2、貼壁單核細胞( M o ) 。分別在含及不含以下細胞因子的R P M I 1 6 4 0 培養(yǎng)液中培養(yǎng)并誘導分化：粒單集落刺激因子( G M —C S F ) 和自介素4 ( I L - 4 ) 、粒單集落刺激因子( G M —C S F ) 、集落刺激因子一1 ( C S F - I ) 和自介素4 ( I L - 4 ) 、 集落刺激因子一I ( C S F 一1 ) 。培養(yǎng)7 d 后收集細胞應用流式細胞儀進行表型分析。利用R T

3、- P C R 方法對培養(yǎng)D c 的C D 8 0 ( B 7 - I ) m R N A 的表達進行檢測。2 、分別在細胞因子G M - C S F 和I L - 4 ，C S F 一1 和I L 一4 誘導單核細胞分化的第三天加入人卵巢癌細胞株3 A 0 的凍融抗原，共培養(yǎng)4 d 后獲得負載腫瘤抗原的成熟D C ；將致敏D c 與從臍血中分離的同種異體T 淋巴細胞共培養(yǎng)3 d ，獲得細胞毒T 淋巴細胞( C T L ) ；四甲基偶氮