樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性免疫反應(yīng).pdf

1、本研究中，我們提取腫瘤源性血管內(nèi)皮細(xì)胞的凍融抗原，負(fù)載從人外周血擴(kuò)增的DC。體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DC誘導(dǎo)的CTL對(duì)腫瘤血管源性內(nèi)皮細(xì)胞的特異性殺傷效應(yīng)；采用免疫重建的NOD/SCID鼠模型，接種負(fù)載抗原的DC疫苗，觀測(cè)其對(duì)皮下肝癌的抑瘤效應(yīng)。本研究的目的是利用DC打破機(jī)體對(duì)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的免疫耐受，誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的主動(dòng)免疫反應(yīng)，探索一種新的抗腫瘤血管治療方法?！　”狙芯坎捎媚z原酶消化法分離HUVEC。用含人肝癌細(xì)胞株HepG2培養(yǎng)

2、上清的條件培養(yǎng)液培養(yǎng)刺激HUVEC增殖，誘導(dǎo)形成腫瘤源性血管內(nèi)皮細(xì)胞(Td-EC)。MTS法檢測(cè)HepG2培養(yǎng)上清液促HUVEC增殖效應(yīng)，ELISA法測(cè)定HepG2培養(yǎng)上清液中hVEGF含量，免疫組化法結(jié)合圖像分析檢測(cè)VEGFR-2在Td-EC的表達(dá)，RT-PCR法檢測(cè)腫瘤內(nèi)皮標(biāo)記(TEM)在Td-EC的表達(dá)。　　本文采用LymphoprepTM分離管分離肝癌患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞，再利用貼壁法去除淋巴細(xì)胞，然后用含rhGM-CSF1