胎盤中NADPH氧化酶1、血管緊張素Ⅱ、活性氧與早發(fā)型重度子癇前期病因的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：子癇前期是嚴(yán)重威脅母兒健康的妊娠并發(fā)癥，目前其病因和發(fā)病機(jī)理尚未完全闡明。現(xiàn)在普遍認(rèn)為孕早期滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力受阻、螺旋小動(dòng)脈重鑄受限和孕晚期血管內(nèi)皮細(xì)胞的廣泛損傷是最終導(dǎo)致子癇前期的兩個(gè)重要環(huán)節(jié)。早發(fā)型重度子癇前期發(fā)病時(shí)距離足月遠(yuǎn)，且病情較重，有學(xué)者認(rèn)為其發(fā)生與滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力減弱關(guān)系更為密切。NADPH(nicotinamide-adeninedinucleotidephosphate，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)氧化酶廣泛存在于吞

2、噬細(xì)胞及非吞噬細(xì)胞中，是吞噬細(xì)胞及非吞噬細(xì)胞活性氧(ROS)的主要來(lái)源。ROS可以引起全身炎癥反應(yīng)；能夠參與胎盤細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化；誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞的凋亡從而影響滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤(rùn)能力，因此是影響妊娠結(jié)局的重要因素。 目前研究發(fā)現(xiàn)NADPH氧化酶家族包括Nox1、Nox2、Nox3、Nox4.和Nox5和二元氧化酶(dualoxidase,Duox)。Nox1主要分布在人的結(jié)腸、前列腺、胃、子宮、胎盤、血管平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等組織和細(xì)

3、胞中。已有研究發(fā)現(xiàn)Nox1能夠參與血管生長(zhǎng)、重塑，在高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化等血管性疾病發(fā)生中有重要作用，并且此作用受血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，Amg Ⅱ)的調(diào)節(jié)。 本研究通過(guò)檢測(cè)胎盤組織中Nox1、ROS、Ang Ⅱ，并通過(guò)分析Nox1分別與ROS、Ang Ⅱ的相關(guān)性，探討它們?cè)谠绨l(fā)型重度子癇前期發(fā)病中的作用，有助于闡明早發(fā)型重度子癇前期的可能病因及發(fā)病機(jī)制。 方法： 1、研究對(duì)象：(1) 實(shí)驗(yàn)組：

4、選擇2007年1月--2007年5月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院住院分娩的重度子癇前期患者20例，其中早發(fā)型重度子癇前期10例(早發(fā)型重度子癇前期組)，平均年齡28.80±6.03，平均孕周33.54±1.24；晚發(fā)型重度子癇前期患者10例(晚發(fā)型重度子癇前期組)，平均年齡28.50±4.55，平均孕周37.37±1.98。(2)對(duì)照組：選擇同期住院分娩的正常孕婦10例，平均年齡27.64±3.41，平均孕周38.47±1.02。 2

5、、樣本收集：所有研究對(duì)象均于胎盤娩出后立即于臍帶附著處母體面，避開鈣化出血梗塞區(qū)(肉眼觀)剪取大小為1cm×1cm×1cm的組織數(shù)塊，用生理鹽水漂洗除去血液，用濾紙吸干水分，一塊組織放入4％多聚甲醛溶液中固定，其余組織塊-80℃冰箱保存。 3、實(shí)驗(yàn)方法：用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Nox1的蛋白表達(dá)；放射免疫法測(cè)Ang Ⅱ的水平；用Fenton顯色反應(yīng)測(cè)ROS水平。 結(jié)果： 1、各組孕婦胎盤組織中Nox1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)比

6、較：Nox1蛋白表達(dá)于細(xì)胞漿，在合體滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、蛻膜細(xì)胞中均可以檢測(cè)到其表達(dá)。早發(fā)型重度子癇前期組Nox1表達(dá)較正常組升高，且差異有顯著性(0.213±0.011，0.115±0.012，P<0.01)；早發(fā)型重度子癇前期組Nox1表達(dá)較晚發(fā)型重度子癇前期組升高，且差異有顯著性(0.213±0.011，0.173±0.011，P<0.01)。 2、各組孕婦胎盤組織勻漿中ROS水平比較：早發(fā)型重度子癇前期組ROS水平較

7、正常組升高，且差異有顯著性(132.44±13.88，46.15±9.95，P<0.01)；早發(fā)型重度子癇前期組ROS水平較晚發(fā)型重度子癇前期組升高，且差異有顯著性(132.44±13.88，76.41±10.76，P<0.01)。 3、各組孕婦胎盤組織勻漿中An Ⅱ水平比較：早發(fā)型重度子癇前期組.Ang Ⅱ水平較正常組升高，且差異有顯著性(381.24±76.39，102.20±15.09，P<0.01)；早發(fā)型重度子癇前期組

8、Ang Ⅱ水平較晚發(fā)型重度子癇前期組升高，且差異有顯著性(381.24±76.39，168.34±31.68，P<0.01)。 4、Nox1與ROS間的相關(guān)性：胎盤中Nox1 表達(dá)與ROS水平呈正相關(guān)(r=0.904，P<0.01)。 5、Nox1與Ang Ⅱ間的相關(guān)性：胎盤中Nox1表達(dá)與AngⅡ水平呈正關(guān)(r=0.834，P<0.01)。 結(jié)論： 1、早發(fā)型重度子癇前期組胎盤中Nox1蛋白的表達(dá)較正常